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本研究利用特殊毒性试验即小鼠骨髓细胞微核试验(MNT)从诱变效应、抗诱变效应对胡桃楸树皮(JMMB)安全性进行评价。受试药物设六个剂量组、阴性对照组(生理盐水,NS)和阳性对照组(环磷酰胺,CP,40mg/ml)。试验结果显示微核率阴性对照组为2.65‰,阳性对照组为28.82‰。JMMB水煎液各剂量组(1/8LD50g/kg,1/4LD50g/kg,1/2LD50g/kg)诱发的微核率与正常对照组比较无明显增加(P>0.05)。JMMB水煎液各剂量组(1/8LD50g/kg+CP,1/4LD50g/kg+CP,1/2LD50g/kg+CP)对CP所致的微核率随着药物浓度的增加微核率有所降低,但是与阴性对照组比较,差异明显(P<0.01);与阳性对照组比较,低剂量组差异无显著性(P>0.05),中剂量组和高剂量组差异显著(P<0.05)。各剂量组之间比较,差异显著(P<0.05)。说明JMMB水煎液无明显诱发微核率增加作用,对CP诱发的微核率有一定抵抗作用,但是不能完全抵抗诱变剂诱发的微核突变。因此在本实验条件下,JMMB对遗传物质无诱变作用,且具有一定抗诱变作用,并有量效关系。本实验还对JMMB总黄酮(Flavonoids)的提取分离纯化工艺和药效学进行了研究。通过超声波提取法,采用60%乙醇、固液比1:15、提取1次时间为30min、温度为75℃的最佳提取工艺提取总黄酮。进一步利用D101大孔树脂柱层析分离纯化总黄酮,条件为:上样速度2BV/h,洗脱流速3BV/h,洗脱剂先水洗4BV,再用5BV50%乙醇洗脱。最终获黄酮纯度为48.98%,纯度提高了5.25倍。总黄酮药效研究通过CCK-8法,确定JMMB总黄酮对白血病细胞K562,胃癌细胞BGC-823有增殖抑制作用,其细胞半效应量IC50分别是0.0223mg/ml,0.0648mg/ml。通过绘制生长曲线分析确定总黄酮对两种肿瘤细胞的增殖抑制作用随着药物浓度的增加而增强(P<0.05)。利用流式细胞术检测总黄酮作用后的细胞周期和细胞凋亡。结果显示在IC50 (0.0223mg/ml)剂量下,K562细胞大部分被阻滞在S期,在IC50 (0.0648mg/ml )剂量时BGC-823细胞大部分被阻滞在G0/G1期。经过不同剂量(1/2 IC50、IC50、2IC50)总黄酮作用K562细胞,给药剂量组与阴性对照组比较,总凋亡率明显提高(P<0.01),各组晚期凋亡比率与阴性比较差异显著(P<0.05),说明JMMB总黄酮对K562细胞诱导凋亡作用明显,发生在细胞晚期,随之药物浓度增加凋亡率增高。BGC-823细胞经过低中高剂量(1/2 IC50、IC50、2IC50)总黄酮作用,给药各剂量组与阴性对照组比较,高剂量组总凋亡率明显增高(P<0.01),且早期凋亡比率高于阴性对照组(P<0.05),说明JMMB总黄酮对BGC-823细胞诱导凋亡发生在细胞早期,药物浓度增加凋亡率相应升高。