【摘 要】
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本研究采用非洲菊深圳5号S5为实验材料,进行再生和转化体系的建立和优化,获得了以下主要结果:建立了两种S5不定芽再生体系.研究表明附加有较高浓度BA、NAA和IAA的1/2MS2培养
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本研究采用非洲菊深圳5号S5为实验材料,进行再生和转化体系的建立和优化,获得了以下主要结果:建立了两种S5不定芽再生体系.研究表明附加有较高浓度BA、NAA和IAA的1/2MS2培养基对于S5花托的愈伤组织以及不定芽诱导效果最好.YY10培养基则最适于从单芽基部切口处直接诱导出丛生芽.而且后者适宜做为转化受体的再生途径.通过根癌农杆菌介导法建立了非洲菊遗传转化体系.通过测定GUS基因的瞬时表达率和抗性芽发生频率,研究影响根癌农杆菌转化非洲菊S5的主要因素.对抗性芽进行GUS的稳定性表达、PCR以及Southern杂交检测,结果表明:经Hyg反复筛选得到12株抗性芽经GUS染色检测全为阳性;其中9株来自上述的同一个最佳试验组合,平均转化率为7.43﹪.这9株GUS阳性抗性芽经PCR扩增、Southern杂交检测,证实外源基因已整合进植物基因组.
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