125I放射性粒子与顺铂、平阳霉素联合作用于体外培养的Tca8113和ACC细胞的研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lishibo13514244774
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[目的]探讨125I放射性粒子与顺铂及平阳霉素联合应用对体外培养的人舌鳞癌Tca8113细胞和涎腺腺样囊性癌细胞增殖的抑制作用,为临床上125I放射性粒子近距离照射治疗和化疗药物的联合应用提供理论依据。[方法](1)常规培养人舌鳞癌Tca8113细胞和腺样囊性癌(ACC)细胞。(2)实验分组:用数字1、2代表Tca8113细胞和ACC细胞;按不同的处理方法进行分组,A为不作处理,B为2.5mg/l顺铂处理72h,C为1mg/l平阳霉素处理72h,D为125I放射性粒子处理72h,E为125I放射性粒子联合2.5mg/l顺铂处理72h,F为125I放射性粒子联合1mg/l平阳霉素处理72h。(3)倒置显微镜观察各组细胞的形态学变化。(4)流式细胞仪(FCM)检测各组细胞的凋亡率。(5)免疫细胞化学染色法检测各组细胞蛋白因子Bcl-2和Bax的表达情况。[结果](1)倒置显微镜下观察各组细胞处理72h的形态学改变:经过顺铂、平阳霉素和/或125I放射性粒子处理后,Tca8113细胞变圆、皱缩、核凝集,胞浆浓缩成泡状,胞内可见大小不等的空泡样结构,大部分细胞膜尚完整,并且细胞数量与对照组比较明显减少,细胞从培养瓶瓶壁脱落,悬浮细胞增多。E、F组与B、C、D组比较,悬浮细胞数目明显增加。经过处理后的ACC细胞变圆、皱缩、核仁消失,由梭形变为不规则形,胞体增大,出现大量的悬浮细胞,E、F组较B、C、D各组悬浮细胞数目显著增多。(2)流式细胞仪TUNEL法检测各组细胞处理72h后凋亡率为:A1、A2组为4.8%、2.4%,B1、B2组为10.9%、12.9%,C1、C2组为15.7%、17.2%,D1、D2组为14.5%、25.3%,E1、E2组为36.4%、44.3%,F1、F2组为53.7%、59.4%。结果表明经过顺铂、平阳霉素和/或125I放射性粒子处理后,Tca8113细胞和ACC细胞的细胞凋亡率均升高,E、F组与B、C、D组相比较,凋亡率的升高有统计学意义。(3)免疫细胞化学染色法分析:经过顺铂、平阳霉素或/和125I放射性粒子处理后,Tca8113细胞和ACC细胞均出现Bax表达增强,Bcl-2表达减弱,且E、F组与B、C、D组相比较,Bax表达升高和Bcl-2表达减弱的幅度最为显著。[结论]125I放射性粒子联合顺铂或平阳霉素对体外培养的Tca8113细胞和ACC细胞的增长抑制作用比单一的化学药物和放疗作用效果更明显;ACC细胞较Tca8113细胞对125I放射性粒子近距离照射更加敏感。
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