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伪狂犬病（Pseudorabies, PR）是甲型疱疹病毒亚科的一个成员，可导致多种家畜和野生动物出现发热、瘙痒和脑脊髓炎等症状的急性传染病。乙型脑炎病是由乙型脑炎病毒（Epidemic encephalitis virus）引起的一种重要的蚊媒性人兽共患传染病，多种动物易感。这两种病毒均引起怀孕母猪流产、产死胎儿或者木乃伊胎，公猪出现睾丸炎或不育，给养猪业的发展造成了巨大的危害和经济损失。目前常用的诊断方法有以下几种：病毒的分离鉴定、酶联免疫吸附试验、中和试验、聚合酶链反应等。虽然这些方法在实际生产中发挥了巨大的作用，但存在操作繁杂、费时费力、费用较高、灵敏性低，同时需要贵重的仪器设备等不足。本研究的目的是建立一种简便快速、灵敏性高、特异性强的检测方法。本研究采用LAMP技术利用PRV DBP基因的一段序列设计了6条LAMP引物，建立了PRV-LAMP检测方法。反应体系是：10×Thermopol反应缓冲液2.5μL，dNTP（10mmol/L）2.0μL，Mg2+（50mmol/L）1.5μL，混合引物（FIP、BIP：40μmol/L；F3、B3：20μmol/L；LF、LB：5μmol/L；将稀释好的引物等量混合）6.0μL，Bst DNA聚合酶（8U）1.0μL，模板DNA2.0μL，加灭菌双蒸水10.0μL。利用JEV的prM protein编码序列设计6条LAMP引物，建立了JEV-LAMP检测方法。反应体系是：10×Thermopol反应缓冲液2.5μL， dNTP（10mmol/L）2.5μL， Mg2+（50mmol/L）2.0μL，混合引物（FIP、 BIP：40μmol/L；F3、B3：20μmol/L；LF、LB：5μmol/L；将稀释好的引物等量混合）6.0μL，Bst DNA聚合酶（8U）1.0μL，模板cDNA2.0μL，加灭菌双蒸水9.0μL。本论文建立了PRV-LAMP和JEV-LAMP两种检测方法。PRV-LAMP在63℃恒温条件下扩增40min可得到最佳结果，灵敏性比PCR方法高100倍，且特异性好，对猪乙型脑炎病毒、圆环病毒Ⅱ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒没有交叉反应。JEV-LAMP在61℃恒温条件下扩增50min得到最佳结果，灵敏性比PCR方法高10倍，与猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒均没有交叉反应，特异性好。两种LAMP检测方法与罗丹明B衍生物荧光染料相结合产生了可视性检测，扩增结束后可直接根据颜色变化判定结果：蓝色为阳性，紫色为阴性。建立的LAMP检测方法，具有简便、快速、敏感性高、特异性好、不需要昂贵的仪器等特点。应用本研究建立的快速诊断方法，对临床样品进行了初步应用，并获得了可靠的诊断结果。