肾癌微环境中肿瘤相关成纤维细胞上B7-H3的表达与生物学功能初步研究

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目的:  检测并分析肾癌组织中肿瘤相关成纤维细胞表面B7-H3表达情况。建立B7-H3-肿瘤相关成纤维细胞模型并探究其在肾癌发生发展中的生物学意义。  方法:  (1)收集2016年6月至2016年8月期间于苏州大学附属第一医院接受肾癌根治术的患者组织标本10例。将组织标本制备成单细胞悬液和冰冻切片,分别采用流式细胞术和免疫荧光技术检测肾癌组织中肿瘤相关成纤维细胞表面 B7-H3表达情况。  (2)原代培养人肾癌相关成纤维细胞并纯化。  (3)利用慢病毒 LV-CD276和阴性对照病毒CON145感染CAFs,分别构建B7-H3-CAFs模型和B7-H3+CAFs模型。  (4)建立肾癌裸鼠皮下荷瘤模型。8只Balb/C裸鼠随机分为2组,分别做以下处理:实验组皮下注射肾癌细胞系A498(106/100μL)及B7-H3-CAFs(4x106/100μL);对照组皮下注射肾癌细胞系A498(106/100μL)及B7-H3+CAFs(4x106/100μL),观察肿瘤生长情况。  结果:  (1)肾癌组织中存在一群B7-H3+的肿瘤相关成纤维细胞。  (2)成功获得纯化的人肾癌CAFs细胞系。  (3)成功构建B7-H3-CAFs模型和B7-H3+CAFs模型。  (4)成功建立肾癌裸鼠皮下荷瘤模型。实验组肿瘤体积较对照组小且差异随时间增长而愈发明显。实验组肿瘤质量较对照组小(p<0.05)。  结论:  肾癌微环境中CAFs表达B7-H3在肾癌发生发展过程中发挥重要作用,沉默CAFs的B7-H3表达在肾癌患者的分子靶向治疗中具有潜在的临床应用价值。
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