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两种法定基源黄芪分为蒙古黄芪Radix Astragali membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao polysaccharides(AOP)和膜荚黄芪Radix Astragali membranaceus(Fisch.)Bge polysaccharides(AEP)。以往的实验,以黄芪皂苷小分子作为黄芪中药的评价指标。随着科学的发展,以多糖作为评价指标则受到越来越多的关注。由于糖类结构较为复杂,不同种类的单糖组成、不同类型的糖苷键以及低聚糖的不同连接方式都会影响中药多糖的药理活性功能。本文从提取的黄芪粗多糖入手,通过经典的化学分析方法:部分酸水解法、完全酸水解法、甲基化法和史密斯(Smith)降解法,对糖类实行水解和衍生化法反应,运用GC-MS、HILIC-HPLC-ELSD、ESI~--QTOF和HILIC-UPLC-ESI~+-HCD-MS~n法对衍生化多糖进行分离和检测,结合指纹图谱、聚类分析等数据处理方法,对多糖的结构进行分析。产生以单糖组成、糖苷键类型、低聚糖连接方式等多糖结构特征为主,对黄芪进行质量评价的一种分析方法。主要研究内容及结果如下:1.基于单糖组成指纹图谱技术的两种法定基源黄芪多糖鉴别研究糖醇硅醚化衍生法结合GC-MS对黄芪多糖进行单糖分析,根据中药指纹图谱相似度分析,7批AEP(S1–S7)的Cr值分别为0.914到0.996,13批AOP(S’1–S’13)的Cr值分别为0.966到0.998,同时采用13批蒙古黄芪与7批膜荚黄芪产生的均谱R’进行对比,以及7批膜荚黄芪与13批蒙古黄芪产生的均谱R进行对比,结果Cr值为0.611到0.796。结果证明,此方法可以对不同基源的黄芪多糖进行鉴定。2.基于史密斯降解指纹图谱技术的两种法定基源黄芪多糖鉴别研究史密斯降解反应结合GC-MS对降解产物乙二醇、丙三醇、赤藓糖醇和非降解单糖进行相似度分析,并判断多糖的糖苷键类型。其中AEP和AOP的相似性值Cr为0.942至0.999之间,而AEP与AOP互相带入对方的均值,Cr值均小于0.743。结果证明,此方法完全可以用来鉴别不同基源的黄芪。降解产物中以丙三醇为主,其次为少量的乙二醇和赤藓糖醇,证明黄芪多糖的骨架结构中存在1→6而不是1→4的糖苷键。根据降解产物中,不同峰面积的比值,其AEP产生的Man/Gal峰面积比值在0.18-0.48之间,而AOP产生的Man/Gal峰面积比值在1.13-1.84之间,证明此方法也可作为鉴别AEP和AOP最具说服力的证据。3.基于阿尔迪醇乙酸酯指纹图谱技术的两种法定基源黄芪多糖结构鉴别阿尔迪醇乙酸酯衍生法结合GC-MS对黄芪多糖中的糖苷键进行相似度分析,并判断多糖的糖苷键类型。其中AEP和AOP的相似性值Cr值为0.935-0.999,而AEP与AOP互相带入对方的均值,其C r值均小于0.784。结果证明,此方法完全可以用来鉴别不同基源的黄芪。且根据每个峰的离子质谱图,可知AEP和AOP图谱中的2和3被鉴定为特征离子峰,峰2表征为1→4连接,峰3表征为1→6连接。4.基于寡糖组成指纹图谱技术的两种法定基源黄芪多糖鉴别研究部分酸水解酸将多糖水解为低聚糖,根据HPLC-HILIC-ELSD的检测结果,可观察到11个聚体,结合指纹图谱分析,AEP和AOP的相似性值Cr值为0.935-0.999,而AEP与AOP互相带入对方的均值,其Cr值在0.613-0.741之间。结果证明,此方法完全可以用来鉴别不同基源的黄芪。采用ESIQ~--TOF结合PCA对寡糖进行检测和分析,结果AOP和AEP具有清晰的集群,完全可以将不同基源的黄芪多糖进行区分和鉴定。为进一步确定黄芪多糖中多聚体的寡糖结构,本实验采用HILIC-UPLC-ESI~+-MS~n法对多糖的温和酸水解产物进行结构鉴定。利用HILIC-UPLC-MS~n技术成功分离并检测了一系列寡糖峰(1-41):主要峰2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36和37-41确认为一系列线性葡聚糖DPs为1→6链己糖共聚物,而小峰1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、2 1、23、25、27、29、31、33和35确定为Glc、Gal或Man比例不同的糖类混合物。因此,黄芪多糖应以1→6糖苷键为主要的线性骨架。