上皮间质转化相关分子促进人甲状腺乳头状癌侵袭转移的表达意义及其分子机制研究

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目的研究金属硫蛋白(metallothioneins, MT)、低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、锌指转录因子Snail与E-钙粘蛋白(E-cadherin)促进人甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)侵袭转移的分子机制及表达意义。方法采用免疫组化SP法,检测91例甲状腺组织(79例为甲状腺乳头状癌,12例为结节性甲状腺肿)中MT、HIF-1α及Snail的表达情况。低氧处理甲状腺乳头状癌K-1细胞12小时,显微镜下观察细胞形态变化,并利用Western Blot与RT-PCR检测MT、HIF-1α、Snail及E-cadherin在蛋白质与mRNA表达水平上的变化,最后利用Transwell实验观察细胞侵袭与迁移情况。结果免疫组化结果表明,在79例甲状腺乳头状癌中,MT、HIF-1α和Snail的阳性率分别为56.96%、92.41%、53.16%。MT、HIF-1α和Snail的阳性表达对于TNM分期和淋巴结转移均具有显著性差异(p﹤0.05)。MT与Snail的表达呈显著正相关(r=0.38850, p=0.0004),MT与HIF-1α呈显著正相关(r=0.22626, p=0.0450),Snail与HIF-1α呈显著正相关(r=0.37145,p=0.0008)。低氧处理K-1细胞12小时后,显微镜下观察K-1细胞单个离散,胞体狭长,呈纺锤形,细胞间隙增大。HIF-1α、MT和Snail的蛋白质表达水平显著增高,E-cadherin的蛋白质表达水平明显下降(P<0.01),低氧组中HIF-1α、MT和Snail的蛋白表达水平与正常氧组蛋白表达水平相比具有显著性差异(P<0.01)。HIF-1α、MT和Snail的mRNA表达水平显增高,E-cadherin的mRNA表达水平明显下降(P<0.01),低氧组中HIF-1α、MT和Snail的mRNA表达水平与正常氧组mRNA表达水平相比具有显著性差异(P<0.01)。侵袭与迁移实验中,低氧组的穿膜与迁移细胞数均较正常氧组有显著的增多(P<0.01)。结论推测MT、HIF-1α、Snail及E-cadherin是针对PTC侵袭转移的早期发现及其预后评估的潜在分子标记物。
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