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目的:探讨苯吡啶缩氨基硫脲对人白血病K562细胞的增殖抑制作用及其可能机制。方法:以新型化合物苯吡啶缩氨基硫脲为研究对象,以顺铂为阳性对照药物,通过MTT比色法、LDH漏出率、台盼蓝据染法观察苯吡啶缩氨基硫脲对K562细胞株体外增殖的抑制作用,并用MTT法和LDH法观察苯吡啶缩氨基硫脲对人正常肝chang liver细胞株体外增殖的抑制作用,考察苯吡啶缩氨基硫脲的体外抗肿瘤活性及其选择性。通过AO/EB染色法利用荧光倒置显微镜观察K562细胞的凋亡形态,Rh123染色法利用荧光分光光度计检测细胞线粒体膜电位的水平变化,钙离子敏感的荧光探针Fura-2/AM利用荧光分光光度计检测K562细胞内游离Ca2+浓度的变化,Hoechst33342/PI染色法利用HCS检测K562细胞的凋亡,从细胞水平探讨苯吡啶缩氨基硫脲的诱导K562细胞凋亡的机制。结果:通过MTT比色法,采用不同浓度的BT处理K562细胞,作用时间分别为24h、36h、48h。结果表明,BT对K562细胞的成长呈现抑制作用,且该作用表现为明显的剂量依赖性和时间依赖性;相同浓度(50μM)下,BT的作用强于CDDP。BT作用于K562细胞48h时,IC50为19.62μM。BT对张氏肝细胞的生长基本无抑制作用。BT使K562细胞的LDH漏出率增加,而对张氏肝细胞的LDH漏出率基本无影响。生长曲线表明,BT对K562细胞的生长呈现抑制作用。AO/EB染色法观察细胞的形态学表明,BT可促进K562细胞凋亡,出现典型的凋亡形态学特征。Rh123染色法测定细胞的线粒体膜电位的变化可看到BT可降低K562细胞的线粒体膜电位。Fura-2/AM结合荧光分光光度计检测不同波长下的荧光强度计算出相应细胞中的Ca2+浓度表明,在1.3mmol/L细胞外Ca2+的情况下, K562细胞正常组的[Ca2+]i为219.2nmol/L ,BT使K562细胞内[Ca2+]i升高。Hoechst33342/PI染色法测定K562细胞的凋亡实验表明,由HCS检测到的细胞的荧光强度值随着BT浓度的增加而逐渐增加,由HCS拍摄到的细胞形态学图片可以看到出现典型的凋亡形态学特征,且凋亡细胞数目显著增多。结论:新型化合物BT可引起人白血病K562细胞显著的损伤和凋亡,且在相同浓度下强于阳性对照药顺铂对K562细胞的生长抑制作用,同时BT对K562细胞的抑制作用呈现明显的浓度依赖性和时间依赖性。