花生油品种溯源技术开发与应用

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本文在筛选改进油品DNA制取方法的同时,利用qPCR、SSR、SNP、SCoT等分子检测手段建立了花生油的油料品种溯源技术,以期为建立健全食用油品质保障体系,为维护良好的食用油市场秩序提供技术支撑。获得的主要实验成果如下:比较多种食用油DNA制备方法,包括传统CTAB、SDS、各种正己烷乳化法、树脂型油类DNA提取试剂盒、QiAamp Fast DNA Stool Mini Kit等,筛选出树脂型油类DNA提取试剂盒的制备效果好,可满足油脂鉴定要求。依据花生内标基因序列设计物种特异性引物,建立并优化了花生油DNA的qPCR检测体系,所得qPCR Cq值与不同稀释浓度的花生油DNA间的标准曲线,其相关系数R2为0.993,表明利用该qPCR体系可实现花生油DNA的定量检测。利用SSR、SNP、SCoT三种分子标记技术,对山东、河南、河北等省份9种主栽花生制备油品展开品种溯源分析。实验先以花生种子DNA为模板进行分子标记引物的初筛,20个SSR标记引物初筛获得多态性引物4个,其中包括特异标记;4个SNP标记引物初筛获得多态性引物2个,其中第一类SNP标记引物是与AS-PCR反应相匹配的,可以作为鲁花8号特异标记,第二类分子标记引物可以将所有供试品种分为2类;6个SCoT标记引物初筛均具有多态性,每个引物都可以作为特异标记。将初筛获得的多态性引物作用于所有供试花生油品DNA,获得了相同的区分效果,证实分子标记技术可以很好地用于花生油油料品种溯源分析。
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