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新城疫也称亚洲鸡瘟或伪鸡瘟,是由新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)引起的急性高度传染性疾病。死亡率极高,严重危害了世界各国养鸡业的发展,在目前使用的化学药物药效不确定,合成周期长,成本高,毒副作用大;疫苗免疫还不完善的情况下,人们又把目光转向了中草药。如何尽快的研制出高效、低残留、低耐药的药物已成为防治ND的一个亟须解决的问题。本研究按正交实验设计采用鸡胚法研究了六种中草药大青叶、板蓝根、鱼腥草、败酱草、虎杖、苦参抗新城疫病毒的活性,对筛选为有效的单药进行科学组方,采用体外细胞培养法研究了中草药抗新城疫病毒的作用方式。确定了大青叶+鱼腥草+虎杖+败酱草+苦参为最佳配伍组合,本实验为进一步研究开发防治新城疫的有效药物提供了理论依据。 本实验在鸡胚和鸡成纤维细胞上均采取三种方式加药:药物和病毒作用一段时间后再接种;先给药后接种病毒:先接种病毒后给药。较系统地对6种中草药和较理想的复方制剂抗新城疫病毒的活性及其作用方式进行了研究。 单味中药在鸡胚上的实验结果表明:大青叶、板蓝根、鱼腥草、败酱草的最大无毒浓度均为相当于生药1.00g/ml,苦参的最大无毒浓度为相当于生药0.80g/ml,虎杖毒性稍大为相当于生药0.30g/ml。在第一种加药方式中:只有苦参没有产生作用,其余五种药物抗NDV的作用均较强;在第二种加药方式中:鱼腥草、败酱草、虎杖、板蓝根效果较好,而苦参及大青叶则几乎不起作用;在第三种加药方式中:板蓝根、鱼腥草、败酱草有较强的作用,大青叶、虎杖次之,由以上结果可以看出在三种方式中,板蓝根、败酱草和鱼腥草抗NDV的作用较强。 本实验经鸡胚法筛选组方,共得出3个较理想的复方制剂①大青叶+鱼腥草+虎杖+败酱草+苦参,②大青叶+苦参+败酱草+板蓝根③大青叶+鱼腥草+败酱草+板蓝根。采用鸡胚法测得各复方的最大无毒浓度均为相当于生药1.00g/ml。 3个较理想复方对成纤维细胞的最大无毒浓度分别是方①:1/32g/ml;方②1/64g/ml;方③1/64g/ml。第一种加药方式中,方①抗NDV的效果最强;第二种加药方式中:方①、②抗NDV作用较强;第三种加药方式中,三方效果都不理想。综上,方①为本实验筛选的最佳复方制剂。 本实验采用鸡胚法和细胞培养法,筛选出具有抗NDV活性的中药复方,并对复方抗病毒作用方式进行了系统的研究,从而为寻找优质的抗NDV活性物质和ND的临床防治提供了理论依据。