补益祛湿活血方及拆方抑制人肾透明细胞癌786-0细胞株PI3K-AKT-NFkB信号转导的研究

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目的:从临床治疗肾透明细胞癌常用的中药中筛选出抑制肾透明细胞癌生长的有效中医方剂,观察该方对肾透明细胞癌的抑制作用,探讨补益祛湿活血方及拆方对肾脏肿瘤疾病的作用机制和中医病机为中医治疗肾脏肿瘤性疾病提供有效可行的方剂。方法:对1979年6月~2013年3月中国期刊数据库(CNKI)收录的中医诊治肾癌的文献,通过频度分析总结出常用的193味中药作为初筛具体药物,用95%乙醇进行浸泡提取,七天后制备提醇药物,以100μg/ml药物浓度处理人肾透明细胞癌786-0细胞,倒置显微镜下观察786-0细胞形态学变化,待48小时后,运用MTT比色法筛选对肾透明细胞癌786-0细胞有确切抑制作用的药物,用正交实验设计选出疗效最好的方剂并组方,同时应用Western blot方法观察这些方药对肾透明细胞癌细胞786-0表达的影响,探讨肾癌发生的中医病机与786-0生长信号转导的关系,寻找治疗肾透明细胞癌的有效方药。结果:1补益祛湿活血方及拆方对细胞786-0的生长明显抑制。2其中补益方、祛湿方、活血方能有效的抑制细胞786-0的生长,全方组抑制作用最强,抑制率随药物浓度、时间的增加而增高,对细胞生长的抑制呈现剂量-效应和时间-效应依赖关系。3人肾透明细胞癌可检测到PI3K、AKT、NHkB蛋白分子的超量表达。4用IC50药物浓度作用细胞时,补益祛湿活血方及拆方能有效的调节PI3K、AKT、NHkB信号通路各个蛋白表达水平。结论:1补益祛湿活血方及其三个拆方对人肾透明细胞癌786-0的生长均有抑制作用,全方组效果最好,补益、祛湿、活血三法具有协同效应。2全方对肾透明细胞癌786-0的抑制具有剂量和时间依赖性作用。3通过药效反证,证实在肾癌病变中,肾虚、热毒、水肿与PI3K、AKT、NHkB信号表达和转导增强关系密切。4通过文献分析和实验研究结果表明:肾脏肿瘤性疾病存在气血俱虚、热毒、水湿不化病机。
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