【摘 要】
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白细胞介素10（Interleukin-10,IL-10）是一种参与免疫调节的抗炎细胞因子,属于IL-10家族,主要由单核巨噬细胞和辅助性T细胞分泌产生。IL-10在机体免疫应答过程中发挥着重要的作用,能够抑制活化的T细胞产生IL-2和IFN-γ等细胞因子、下调单核/巨噬细胞MHC-Ⅱ类分子的表达、抑制抗原递呈细胞的抗原递呈能力及NK细胞的功能。硬骨鱼类IL-10基因首先在红鳍东方鲀中被发现,目前
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白细胞介素10（Interleukin-10,IL-10）是一种参与免疫调节的抗炎细胞因子,属于IL-10家族,主要由单核巨噬细胞和辅助性T细胞分泌产生。IL-10在机体免疫应答过程中发挥着重要的作用,能够抑制活化的T细胞产生IL-2和IFN-γ等细胞因子、下调单核/巨噬细胞MHC-Ⅱ类分子的表达、抑制抗原递呈细胞的抗原递呈能力及NK细胞的功能。硬骨鱼类IL-10基因首先在红鳍东方鲀中被发现,目前已在斑马鱼、金鱼、鲤鱼和大黄鱼等鱼类中被克隆鉴定。巨噬细胞是一种具有吞噬和杀伤病原菌、分泌细胞因子和抗原递呈功能的重要免疫细胞,其可通过分泌IL-10等细胞因子参与抑制炎症反应。同时,IL-10对巨噬细胞功能又具有一定的免疫调节作用。本研究中,我们在大黄鱼（Larimichthys Croea）已克隆鉴定到的IL-10（本研究命名为IL-10a）基因的基础上,克隆到了大黄鱼另一IL-10基因（命名为IL-10b）。大黄鱼IL-10b（Lc IL-10b）的开放阅读框全长495 bp,编码164个氨基酸,含有一个IL-10保守的半胱氨酸残基（C30）和一个仅存在于鱼类IL-10中的保守半胱氨酸残基（C31）。多序列比对结果表明Lc IL-10b与Lc IL-10a氨基酸序列的一致性为83%,而两者基因结构上的差异主要表现在Lc IL-10a的第四个内含子转变为Lc IL-10b的外显子并提前出现终止密码子。系统进化树结果表明Lc IL-10b和其他硬骨鱼类IL-10聚为一支,且Lc IL-10b和红鳍东方鲀的亲缘关系最近。组织分布结果显示,Lc IL-10a、Lc IL-10b在各受检组织中都为组成型表达,其中以鳃中Lc IL-10a和Lc IL-10b的分布量最高。最后,我们检测了重组大黄鱼IL-10a（r Lc IL-10a）和IL-10b（r Lc IL-10b）蛋白对大黄鱼巨噬细胞吞噬、杀菌、活性氧（ROS）、一氧化氮（NO）及炎症细胞因子基因表达的影响,结果表明r Lc IL-10a对大黄鱼巨噬细胞吞噬和杀菌活性无影响,但却可抑制大黄鱼巨噬细胞活性氧和一氧化氮的产生,上调促炎细胞因子基因的表达;而r Lc IL-10b可上调巨噬细胞吞噬和杀菌活性,诱导活性氧和一氧化氮的产生,下调促炎细胞因子基因的表达。这些结果表明,两种大黄鱼IL-10基因在调节巨噬细胞功能方面存在不同的功能。
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