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目的建立加味丹参饮(Jiawei Danshen Yin,JDY)中总黄酮和总多糖的富集工艺,研究加味丹参饮(Jiawei Danshen Yin,JDY)中总黄酮和总多糖预防心肌缺血再灌注损伤(ischemic reperfusion injury,IRI)的保护作用。方法将加味丹参饮处方采用以水为溶剂,加热回流,得到加味丹参饮溶液,浓缩醇沉,沉淀为富集得到的总多糖,上清液过大孔树脂富集得到总黄酮,采用紫外法测定所得多糖和黄酮的纯度。同时,取健康SD大鼠90只,雌雄各半,随机分为空白组、模型组、恬尔心(阳性对照)组、复方丹参滴丸(阳性对照)组、加味丹参饮组、总黄酮高剂量组、总黄酮中剂量组、总黄酮低剂量组及总多糖组,每组10只。空白组和模型组予生理盐水,其他实验组大鼠均灌胃给予相应药液,灌胃7天(1次/天),其中,灌胃剂量均为2.5 ml。末次给药30min后开胸。采用结扎后放松大鼠心肌冠状动脉左降支的造模方法,建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。实验完后立即取大鼠心脏。空白组正常饲养,实验时开胸后直接取心脏。用总黄酮、总多糖对心肌缺血再灌注损伤模型进行预处理,采用HE染色法观察大鼠心肌梗死面积变化;采用免疫组化法检测大鼠心肌组织中Bcl-2/Bax表达值;采用Tunnel染色观察大鼠心肌细胞凋亡情况。结果药液浓缩至1/4后,多糖和黄酮得率最高,AB-8树脂对黄酮的富集的效果最好,总黄酮类成分主要在10%-50%乙醇洗脱部位。药效学实验表明,加味丹参饮组、阳性药物组、总黄酮不同剂量组和总多糖心肌心肌梗死面积较模型组减少(P<0.05),电镜下显示,总黄酮低中高剂量组和总多糖组有效改善心肌细胞的超微结构。免疫组法和Tunnel染色结果显示,IRI组Bax蛋白表达量增加,细胞凋亡显著增加,与空白组比较差异具有统计学意义(P<0.01),加味丹参饮总黄酮高剂量组、总黄酮中剂量组、总黄酮低剂量组及总多糖组都能增加Bcl-2/Bax表达比值,抑制细胞凋亡,与IRI组比较具有统计学意义(P<0.05)。结论本文建立的对加味丹参饮总黄酮和总多糖的富集工艺呈现良好的优点,可用于对复方药物的分离:加味丹参饮中总黄酮和总多糖能有效减少心肌IRI时Bax蛋白的表达量,增加促凋亡基因Bcl-2蛋白的表达,抑制心肌细胞凋亡,减少心肌组织梗死面积,发挥其心肌保护作用。