乌拉草化学成分和药理作用的初步研究

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乌拉草(Carex meyeriana Kunth)系莎草科(Cyperaceae)薹草属(Carex)植物的全草,是保暖除湿的传统中药。以乌拉草为主要原料制成的鞋垫、护腰和床垫等,具有祛寒除湿、活络止痛、抗菌等功效,适于脚癣的预防和治疗。长期使用对风湿、关节痛有辅助治疗作用。有关乌拉草报道多集中在应用方面,化学成分分析和药理作用研究的文献报道较少。本研究分析了乌拉草的化学成分,首次从该属植物中得到了木犀草素;对乌拉草挥发油提取工艺进行了比较研究;在结构确证的基础上,首次用高效液相色谱法和毛细管气相色谱法等分析手段测定了各化学成分的含量;首次考察了乌拉草挥发油的抗菌药理活性。 (1) 乌拉草中木犀草素提取分离和结构鉴定 乌拉草药材粉末甲醇冷浸,浓缩,聚酰胺柱层析分离,经制备液相色谱法纯化后得到一黄酮类化合物,经UV,IR,MS,1HNMR,13CNMR光谱鉴定为木犀草素,与文献报道木犀草素相关数据一致。 (2) 乌拉草中木犀草素含量测定 对乌拉草中木犀草素的提取工艺进行考察,确定了最佳工艺为:取乌拉草粉末适量,加30倍量甲醇,提取1.5h,共提取3次。首次建立了乌拉草中木犀草素含量测定的HPLC法,色谱条件为:色谱柱KromasilC18(5μm,250×4.6mm);流动相:甲醇-0.2%磷酸溶液(56:44,PH3);检测波长254nm。其线性范围为0.44~8.80μg·ml-1(r=0.9999);回收率为99.0%(RSD=1.9%)。所建立的方法简便、准确、重现性好,可作为评价乌拉草质量的指标。 (3) 乌拉草挥发油提取工艺的比较研究和含量测定 本研究对有机溶剂提取、超临界CO2萃取和水蒸气蒸馏等不同方法提取的乌拉草挥发油进行比较,利用GC-MS进行定性、定量分析。结果表明不同挥发油的主要成分相差较大,采取水蒸气蒸馏和超临界CO2萃取的挥发油品质较优,色谱峰较多,水蒸气蒸馏法为提取乌拉草挥发油的理想方法。用正交试验法对挥发油提取工艺进行优化,确定了最佳工艺为:取乌拉草粉末适量,加10倍蒸馏水,浸泡1h,提取9h。首次用毛细管气相色谱法同时测定乌拉草挥发油中主要成分月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸的含量。色谱条件为:SE-30毛细管柱(30m×0.32mm×0.6μm);程序升温;进样温度280℃;检测器温度280℃;载气:N2;流量:40mL·min-1;FID检测器;内标物正十六烷。其线性范围分别为月桂酸0.226~2.26(r=0.9999),肉豆蔻酸0.332~3.32(r=0.9993),棕榈酸1.79~17.90mg·mL-1(r=0.9995);回收率分别为
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