仿生法评定猪植物性饲料磷消化率方法的参数研究

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本论文通过四部分试验对在单胃动物仿生消化系统(SDS-Ⅰ型)上进行磷体外消化率评定的适宜分析方法、适宜非酶促反应条件及三步模拟消化必要性进行系统研究,为磷体外模拟消化操作规程的确立提供依据。第一部分旨在研究不同截留分子量及来源的透析袋对仿生消化法评定猪饲料原料干物质和磷消化率测值的影响,为探讨仿生消化法评定磷体外消化率的可行性提供参考。选用美国ViskaseMWCO14000Da、7000Da、3500Da以及美国光谱医学MWCO3500Da、1000Da五种透析袋,评定玉米、豆粕、麦麸的干物质和磷的体外消化率。结果表明,随着截留分子量的缩小,使用美国Viskase透析袋测得饲料干物质及磷消化透析率均逐渐降低(P<0.05)。在本试验条件下,两种不同截留分子量美国光谱医学透析袋测得饲料原料的干物质及磷消化率存在差异,但最大仅分别相差3.35%和1.67%,且美国光谱医学3500Da透析袋测得饲料原料干物质及磷消化率显著高于Viskase3500Da透析袋测定结果(P<0.05),而与Viskase14000Da透析袋测定结果接近。本试验结果表明,ViskaseMWCO14000Da的透析袋更适宜于仿生法测定饲料的干物质消化率;ViskaseMWCO3500Da透析袋测得饲料磷消化透析率最低,最接近报道的体内结果。第二部分采用传统磷体外消化操作,比较不同截留分子量透析袋条件下猪饲料原料总磷与无机磷透析量,探讨在SDS-Ⅰ型仿生消化系统上进行饲料有效磷快速测定的适宜分析方法。试验1研究现有透析袋分离无机磷与有机磷的有效性,选用ViskaseMWCO14000Da、3500Da的透析袋分别测定玉米、豆粕、麦麸消化残渣总磷及透析液无机磷含量。试验2选用ViskaseMWCO14000Da、3500Da透析袋,通过测定透析液无机磷含量,评定了玉米、豆粕、米糠、菜粕及麦麸磷的体外消化率。结果显示,两种透析袋条件下测得透析液中均存在有机磷,表明残渣总磷测定法并不适用于磷体外消化率的评定。MWCO14000Da透析袋条件下,透析液无机磷测定法测得饲料磷消化透析率结果均显著高于3500Da透析袋条件下测定结果(P<0.05),且测定结果变异系数均在4%以下,低于其他研究者报道的结果。本试验结果表明,目前市场上销售的透析袋无法实现饲料中有机磷的完全截留;而MWCO14000Da透析袋条件下,透析液无机磷测定法测得实验结果较高,且测值精度高,更适宜于仿生法饲料磷体外消化的研究。第三部分旨在获取影响仿生法测定饲料磷消化率的适宜缓冲溶液体积、流速及样品粉碎细度。缓冲溶液体积设置600、800和1000mL三个水平;流速设置283、425、496mL/min三个水平;样品粉碎细度设置40和60目两个水平。结果表明,缓冲溶液体积对玉米、麦麸磷消化率影响不显著(P>0.05),对豆粕磷消化率虽存在显著性影响(P<0.05),但最大仅相差1.29%。建议透析液体积为600~1000mL均可。随着透析液流速的增加,玉米、豆粕、麦麸磷的消化率均无显著变化(P>0.05)。粉碎过40目和60目的玉米、豆粕、麦麸磷的消化率均无显著差别(P>0.05)。第四部分通过研究大肠模拟消化对磷体外消化透析率的影响,探讨三步法评定饲料磷消化率的必要性。本试验在两步法的基础上,大肠阶段分别选用纤维素酶和复合酶进行模拟消化,并设置空白对照组。结果表明,与对照组相比,处理组磷的消化率并没有升高,反而略有下降。因此,对于磷的体外消化研究,大肠阶段没有模拟的必要性。
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