目的：肥胖被认为是一种慢性炎症状态，肥胖患者往往伴有游离脂肪酸（FFA）的升高，其与巨噬细胞炎症反应的激活密切相关。CO是一种具有抗炎作用的分子，本实验利用CO对FFA刺激的巨噬细胞炎症反应进行干预，检测其对巨噬细胞炎症反应相关蛋白NF-κB、GRP78和因子TNF-α、IL-6的影响，初步探讨CO对FFA刺激巨噬细胞炎症反应的调节作用及机制，为肥胖及其相关疾病发病机制的研究和治疗提供新的方向和思路。方法：1. RAW264.7巨噬细胞体外培养。2. MTT法检测不同浓度FFA对巨噬细胞活力的影响。3.不同浓度、时间点用含FFA的DMEM培养基作用于巨噬细胞，收集细胞上清，ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-6的变化，以确定FFA的最佳实验浓度。4.不同浓度CORM-2（CO释放分子）干预FFA刺激的巨噬细胞，收集细胞上清ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-6的变化，以确定CO的最佳实验浓度。5.将状态良好的巨噬细胞分为空白对照组、FFA组、CO对照组、FFA+CO干预组，处理24h后分别收集细胞上清和细胞。Western Blot检测p-NF-κB和GRP78蛋白表达水平，ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-6的变化。结果：1. MTT法检测不同浓度FFA（25、50、100、200μM）对巨噬细胞毒性的影响，结果表明与空白对照组比较，以上浓度的FFA对巨噬细胞均无毒性影响。2.含不同浓度FFA的培养基作用于RAW264.7巨噬细胞，TNF-α水平随着FFA处理时间延长而逐渐升高，24h变化最明显，IL-6表水平在0-12h变化不明显，24h迅速增加；在同一时间点，随着FFA浓度增加，TNF-α、IL-6水平逐渐升高。据此，最佳FFA处理浓度和检测时间分别确定为100μM和24h。3．用不同浓度的CORM-2（10、50、100、200μM）干预100μM FFA刺激的巨噬细胞后，随着CORM-2浓度的增加，炎症因子TNF-α、IL-6水平逐渐降低；100μM与200μM CORM-2处理结果无显著差异，故CORM-2最佳浓度选取100μM。4．与空白对照组相比，FFA组p-NF-κB、GRP78蛋白表达水平明显升高，CORM-2干预后p-NF-κB、GRP78蛋白表达水平均显著降低。结论：1.FFA刺激可引起巨噬细胞炎症反应，炎症反应随着FFA的剂量增加和作用时间延长而增强。2.CO对FFA刺激巨噬细胞引起的炎症反应有明显抑制作用，可能与抑制NF-κB磷酸化和降低GRP78表达有关。