大麦成熟胚再生体系的构建及相关生理指标的测定

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大麦是我国第四大粮食作物,同时也是啤酒工业的主要原料。大麦再生体系的建立依据植物细胞全能性,通过培养愈伤组织,分化形成新的植株的过程。它是进行诸多研究的基础,特别是转基因技术,更有赖于一个遗传稳定性高的再生体系。为筛选出组织培养特性优良的大麦品种,建立高效的再生体系,并进一步了解大麦的再生过程及其再生植株的变异情况。本研究选用西北地区主栽品种甘啤3号、甘啤4号、甘啤6号及从德国引进品种玛俐、博乐五个大麦品种。分别研究了基因型、培养基成分、种子处理方式等因素对大麦成熟胚组织培养的影响;并且研究了大麦再生过程中生理指标及内源激素含量的变化,对再生苗与同时期栽培苗的生理指标进行测定。研究结果如下:1.遗传差异性分析结果表明,5个品种有一定的遗传差异,其中甘啤3号、甘啤4号和甘啤6号聚为一类,玛俐和博乐聚为一类。不同品种的出愈率、绿点率和绿苗率均存在极显著差异,其中博乐的综合表现最好。甘啤3号、甘啤4号、博乐等3个品种的愈伤组织诱导频率和分化绿苗率均较高,是适合遗传转化的受体材料。脱分化培养基A3、继代培养基B、分化培养基C2是适合进行再生体系构建的培养基。胚刮碎与纵切的愈伤组织诱导率显著高于横切。2.随着愈伤组织的发育,其SOD、POD、CAT的活性变化均呈先上升后下降的趋势,在培养的前7d时均处于一个较低的水平,随着愈伤组织的发育而升高,第14d时均达到最大值,随后逐渐降低直至分化成为幼苗。在愈伤组织发育过程中MDA含量保持在一个较低的水平(≤9.114umol/g)。不同品种的再生苗各项生理指标之间差异显著,不同品种再生苗与同时期栽培苗之间各项生理指标有相似的规律。3.大麦成熟胚愈伤组织在培养714d时,GA3及IAA含量急剧升高,但ABA及ABA/IAA的比值却处于相对较低水平。当愈伤组织继代培养进入再分化时期时,ABA含量升高,而IAA与GA3的含量却呈下降趋势,此时,ABA/IAA的比值升高,ABA/IAA的比值达到最高时是不定芽分化的最佳时期。
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