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目的：1.探讨外源性Notch1基因转染入MCF-7(乳腺癌细胞)细胞后的表达情况；2. Notch1基因过表达对MCF-7细胞增殖的影响。方法：1.从人胶质瘤U251细胞中提取细胞总RNA,经聚合酶链反应PCR获取Notch1目的基因胞内区全长,PCR产物经BamHⅠ与EcoRⅠ双酶切,用T4DNA连接酶将PGEMT-easy载体与上述酶切产物连接,转化大肠杆菌感受态细胞DHα5,37℃恒温摇床过夜,挑菌落,提质粒,酶切鉴定,送检测序。2.重组质粒PGEMT-NICD通过AdMax腺病毒包装系统转染HEK293细胞,转染成功后共感染乳腺癌MCF-7细胞。3.采用聚合酶链式反应PCR法与Western blotting蛋白检测法检测转染质粒前后Notch1基因与蛋白的表达情况。4.采用MTT比色法试剂盒分析Notchl过表达对MCF-7细胞增殖的影响。5.统计学处理均采用SPSS17.0统计软件,统计学数据用均数±标准差(x±S)表示,组间比较用t检验,P＜0.05为有统计学意义。结果：1.经聚合酶链反应PCR扩增获得了2.3kb的目的基因片段,测序结果与GENE BANK中Notchl基因序列一致。成功构建真和表达载体PGEMT-NICD,并且经BamHI与EcoR I双酶切可得到5.0kb与2.3kb的两条基因片段,在此经酶切法证明重组载体构建正确。2.重组腺病毒Ad5-NICD感染MCF-7细胞后,Notchl基因与蛋白表达均较未转染组明显增加(P<O.05)。3.重组腺病毒Ad5-NICD感染MCF-7细胞后,MTT比色法检测感染组与未感染组比较,细胞增殖抑制率下降(P<O.05)。结论：1. Notchl基因导入乳腺癌细胞MCF-7可测得Notchl基因及相关蛋白的高表达。2. Notchl基因的过表达可以明显增强MCF-7细胞的增殖能力。