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目的:观察半胱天冬酶在淋巴滞留性脑病大鼠大脑颞顶皮层和海马的表达情况及其与神经元凋亡之间的关系,并对淋巴滞留性脑病大鼠神经细胞凋亡的分子机制进一步探讨。方法:健康雄性Wistar大鼠(176只,体重180-250克)随机分为正常对照组,手术组及假手术组,手术组采用Casley-Smith法阻滞颈淋巴,假手术组只分离、暴露颈淋巴结和淋巴管。每组大鼠在术后1、3、5、7和14d观察以下各指标:行为学观察;用TUNEL染色检测神经细胞凋亡情况;用免疫组化来检测Caspase-3的表达情况;用RT-PCR来观察Caspases mRNA的表达情况。结果:(1)手术组动物表现精神萎靡,嗜睡,自主动作减少,对外界刺激发应淡漠等,术后3—5天最明显;而假手术组和正常对照组无明显变化。(2) TUNEL:手术组TUNEL染色显示皮层及海马均存在神经细胞凋亡,皮层术后5天最多,而海马术后3天最多,与假手术组及正常对照组比较有统计学意义(p<0.05)。(3)免疫组化:手术组皮层及海马存在Caspase-3的表达,术后3天表达最明显,且海马更明显,与假手术组及正常对照组比较有统计学意义(p<0.05)。(4) RT-PCR:1) Caspase-3mRNA:手术组Caspase-3 mRNA在脑淋巴引流阻断后前3天内表达上调,其中术后1天表达最高,且海马较皮层表达更明显,与假手术组及对照组高有统计学意义(p<0.05)。2)Caspase-9mRNA:手术组与假手术组、正常对照组之间无统计学意义(p>0.05)。3)Caspase-11mRNA:手术组皮层的Caspase-11mRNA表达各组间无统计学意义。但手术组海马,术后3、5天表达升高,以3天时升高最明显,与假手术组及正常对照组比较有统计学意义(p<0.05)。4) Caspase-12mRNA:手术组皮层,Caspase-12 mRNA的表达在术后1天即升高,3天时达到高峰,5天时开始下降,术后7天恢复,其中1、3、5天与正常对照组及假手术组有统计学意义(p<0.05)。手术组海马,术后1、3天表达升高,且1天时为最高,术后7天恢复,其中1、3天与正常对照组及假手术组有统计学意义(p<0.05)。5)内参照β-actin:其灰度值在手术组、假手术组及正常对照组均一致。结论:本实验证实大鼠脑淋巴引流阻滞后,大脑皮层及海马均存在神经元凋亡,凋亡可能与Caspase-3的激活有关;Caspase-11、Caspase-12可能也参与了凋亡机制中的某些环节。