【摘 要】
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睾丸作为雄性动物的主要繁殖器官,具有产生雄性配子及雄激素的功能。睾丸参数及其内部物质的变化对公羊繁殖力有较大影响,如睾酮、脂肪酸、氨基酸等。本研究基于广泛非靶向代谢组学技术探索6月龄湖羊不同大小睾丸及3月龄湖羊睾丸代谢物变化,探索影响湖羊睾丸发育的关键代谢物,并对其机制进行初步研究,进一步为湖羊繁殖性能的提升提供理论依据。主要研究内容和结果如下:（1）345只6月龄湖羊左侧睾丸重量、左侧睾丸长径、
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睾丸作为雄性动物的主要繁殖器官,具有产生雄性配子及雄激素的功能。睾丸参数及其内部物质的变化对公羊繁殖力有较大影响,如睾酮、脂肪酸、氨基酸等。本研究基于广泛非靶向代谢组学技术探索6月龄湖羊不同大小睾丸及3月龄湖羊睾丸代谢物变化,探索影响湖羊睾丸发育的关键代谢物,并对其机制进行初步研究,进一步为湖羊繁殖性能的提升提供理论依据。主要研究内容和结果如下:（1）345只6月龄湖羊左侧睾丸重量、左侧睾丸长径、左侧睾丸短径、左侧附睾重量与精子浓度之间均呈正相关（R＞0.5）,其中随机55只湖羊的曲细精管管径与左侧睾丸重呈强正相关（R＞0.9）,大睾丸组（A组）精子浓度显著高于小睾丸组（B组）（P＜0.01）。（2）大、小睾丸组与3月龄组睾丸（C组）共鉴定出660个代谢物,A vs C、B vs C、A vs B中分别检测到270个（187个下调、83个上调）、226个（169个下调、57个上调）、147个（69个下调、78个上调）差异代谢物,选取其中两组及以上交集的233个代谢物进行KEGG富集分析,主要富集于脂代谢、能量代谢与蛋白质代谢等途径。能量代谢相关基因（GLUT8、LDH、CS、G6PD、PDHA2、ADPGK等）、脂代谢相关基因（ACSL1、CPT1、FABP3等）、氨基酸代谢相关基因（GLUD1）、抗氧化相关基因（Cu Zn-SOD）均在A组表达量显著高于B、C两组（P＜0.05）,A组睾丸脂肪酸合酶、柠檬酸合酶、丙酮酸脱氢酶、乳酸脱氢酶的酶活力与总抗氧化能力均极显著高于B组（P＜0.01）。（3）6月龄湖羊睾丸重量与粗脂肪含量呈正相关（R＞0.3）,A组粗脂肪与甘油三酯含量显著高于B组（P＜0.05）。睾丸脂肪酸谱随睾丸重量变化而改变,A组睾丸总脂肪酸和饱和脂肪酸含量显著高于B组（P＜0.05）,而B组睾丸单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸、尤其是n-3多不饱和脂肪酸含量显著高于A组（P＜0.05）。脂质代谢相关基因与蛋白ELOVL2、FADS2在A组表达量均显著高于B组（P＜0.05）。免疫组化结果表明ELOVL2与FADS2主要表达于支持细胞与间质细胞。（4）不同浓度DHA（0、2.5、5、10、20、50μM）处理支持细胞48 h后,支持细胞活力与DHA浓度呈正相关。其中50μM DHA处理组显著提高细胞活力（P＜0.01）,显著上调促增殖基因PCNA、抗凋亡基因Bcl2的表达量并且抑制促凋亡基因BAX的表达（P＜0.05）,显著提高支持细胞抗氧化能力（P＜0.05）、促进脂质沉积。综上,大睾丸组睾丸促进了能量代谢、脂质代谢、蛋白质代谢以及抗氧化能力,并在脂质代谢中促进了脂肪沉积与脂肪酸合成,改变了脂肪酸谱。关键代谢物DHA具有促进支持细胞增殖的能力。
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