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组织蛋白酶D基因在家蚕变态发育过程中起着非常重要的调控作用。为探讨家蚕组织蛋白酶D（BmCatD）基因的调控分子机制，本研究以BmCatD基因启动子为研究对象，以能感染AcMNPV的家蚕为研究材料，通过构建含BmCatD调控元件启动子的双荧光AcMNPV表达载体，结合Over-lap PCR基因定点突变方法，研究了该基因启动子调控元件在家蚕体内的表达活性。获得如下研究结果：确定了该基因启动子转录起始位点，该位点位于起始密码子ATG上游-90bp处。选定转录起始位点前约1500bp的启动子序列为研究对象，生物信息学分析表明，BmCatD基因启动子中有3个蜕皮激素受体调控元件（ecdysone responseelement， EcRE）： EcRE1， TTCGATTGACA （-109bp～-99bp）； EcRE2，TTTAACTGAAA（-836bp～-826bp）和EcRE3，TTGGAATGAAA（-856bp～-846bp）。通过Over-lap PCR基因定点突变方法，对EcREs调控元件相对保守碱基进行突变，将突变的启动子片段克隆到双荧光AcMNPV表达载体中，并检测在家蚕脂肪体中的表达活性，结果表明，突变后的3个EcREs对BmCatD启动子的表达活性都呈下调影响，说明EcREs元件参与了BmCatD启动子活性的调控，且临近转录起始位点的EcRE1元件调控作用影响最大。通过对该基因启动子序列5’端顺次缺失，研究了启动子长度对BmCatD基因转录调控的作用影响。对该基因启动子+91―-1363bp序列进行5’端顺次缺失，用PCR方法构建了6个不同长度的启动子序列片段：P1214（-1214bp）、P925（-925bp）、P801（-801bp）、P501（-501bp）、P234（-234bp）和P95（-95bp）。再分别将上述启动子片段克隆到双荧光rAcMNPV供体质粒中进行病毒表达并接种家蚕，检测5龄第4天荧光素酶报告基因在家蚕脂肪体中的表达活性。结果表明，长短不同的启动子之间，其活性值有差异，在925到501区间中可能存在一些调控元件，但对BmCatD基因的基本转录影响不大；而在BmCatD启动子转录起点上游在-1214至-925区间内，存在未知的转录调控抑制元件。进一步对P1214启动子从转录起始点上游-1214到-925区间部分删除，发现缺失-1071到-1038区间的启动子对BmCatD的表达活性影响最大，提示BmCatD基因反式调控因子的结合位点位于-1071到-1038区间的33bp序列上。