ARMS2基因干扰对视网膜色素上皮细胞促炎介质的影响

来源 :济南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:war_and
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目的研究旨在阐明年龄相关性黄斑变性易感因子2(age-related maculopathysusceptibility2,ARMS2)基因和促炎因子之间的关系,以探讨其在年龄相关性黄斑变性发生中可能发挥的作用。方法采用siRNA技术抑制ARMS2在ARPE-19细胞中的表达,Realtime PCR、Western blot检测ARMS2基因抑制效率;以Real-time PCR和ELISA检测ARPE-19细胞C3,C5,IL-6,IL-8,TNF-α分泌水平;比较ARMS2被抑制前、后ARPE-19细胞C3,C5,IL-6,IL-8,TNF-α分泌水平的变化。结果通过Realtime PCR检测ARMS2在实验组(ARMS2-siRNA)(0.72±0.18)的表达水平与正常组(1.00±0.00)及对照组(scrambled siRNA,0.96±0.35)相比明显下降,差异均有显著性,P值均小于0.05;,通过Western blot检测正常组,对照组(scrambled siRNA),实验组(ARMS2-siRNA)的ARMS2蛋白分泌水平分别为0.85±0.122,0.87±0.143, and0.61±0.240(F=42.53, P<0.01);ELISA检测C3,C5,IL-6,IL-8,TNF-α的蛋白分泌水平实验组较正常组分别下降了34.24±1.812%,37.15±2.021%,35.11±1.751%,30.11±2.191%, and34.33±2.182%(P<0.05);Realtime PCR检测C3,C5,IL-6,IL-8,TNF-α的TAI(TAI=2-delta delta CT)实验组较正常组分别下降了34.24±1.812%,37.15±2.021%,35.11±1.751%,30.11±2.191%, and34.33±2.182%(P<0.05)。结论本研究的证据支持AMD风险等位基因为ARMS2直接或间接与促炎介质相关的观念。更重要的是,我们的数据表明,ARMS2基因可能影响C3,C5,IL-6,IL-8,TNF-α的分泌水平,这也可能AMD发生机制之一。
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