费菜总黄酮的分离与抗氧化活性研究

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费菜(Sedum aizoon),又名养心菜、景天三七等,属景天科景天属多年生草本植物,食用时略带苦味,对心脏病、糖尿病有一定抑制作用,具有养心、降血脂等功效。本文利用四川绵阳地区的费菜研究费菜总黄酮提取工艺的优化,以及大孔树脂对费菜总黄酮的纯化,将费菜总黄酮进行有机溶剂萃取分离,并通过主成分分析研究其各极分抗氧化活性,最后对不同极分的费菜总黄酮进行初步鉴定研究。主要研究内容和结果如下:(1)通过单因素实验,比较各单因素对费菜茎、叶中总黄酮提取的影响,通过响应面法设计优化提取条件;以Vc和BHA为对照,研究相同质量浓度下费菜茎、叶总黄酮的抗氧化活性。结果表明,同一单因素对费菜茎、叶总黄酮提取影响不同,茎总黄酮提取最优条件为:料液比1:64、温度88.5℃、提取时间4 h、乙醇浓度80%,叶总黄酮提取最优条件为:料液比1:52、温度87℃、提取时间3.31 h、乙醇浓度81%;最优提取条件下,茎、叶总黄酮提取率分别为1.61%、4.13%。(2)通过比较D-101、AB-8、X-5、DA-201 4种大孔吸附树脂对费菜总黄酮的静态吸附和解吸附性能,筛选出最适合的树脂及最佳静态吸附-解吸附条件。对纯化后的总黄酮进行初步鉴定,并考察了纯化前后的体外抗氧化效果。初步判断纯化后的费菜总黄酮可能含有水飞蓟素类、金丝桃苷类、山奈酚类、槲皮素类化合物。(3)以Vc(抗坏血酸)和BHA(叔丁基羟基茴香醚)做阳性对照,采用DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基(O2-·)、还原力、ABTs+·阳离子自由基和总体外抗氧化模型,主成分分析综合评价费菜总黄酮各级分(乙酸乙酯层、正丁醇层、氯仿层和水层)的抗氧化活性。结果显示,各级分的抗氧化活性均随着黄酮浓度增加呈现上升趋势,其中对ABTs+·的清除能力最强,高达(99.72±0.10)%,与Vc清除能力相当。乙酸乙酯层的·OH清除率、O2-·清除率、总抗氧化FRAP值、等五个抗氧化活性指标明显高于其他萃取层,而DPPH自由基为氯仿萃取层的清除活性最强。主成分分析综合评价显示,乙酸乙酯层抗氧化活性最佳。显色反应结合红外光谱分析,初步判定乙酸乙酯层和正丁醇层可能为黄酮醇类。费菜总黄酮具有较强的抗氧化活性,可作为良好的健康食品原料开发及利用。
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