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[目的]通过体外动物实验探究重度烧伤在进行切痂后的炎性变化情况,同时在此基础上使用脐带间充质干细胞,观察其炎性调控作用及对移植皮片的影响,并加快干细胞在烧伤临床运用的转化。[方法]1、首先探讨重度烧伤休克期切痂后的炎性变化,将SD大鼠随机分为3组,模型组:建立SD大鼠30%Ⅲ度烫伤模型并常规补液抗休克;切痂组:12h在模型组的基础上进行切痂手术并使用异体网状皮覆盖;假手术组:37℃烫伤后抗休克,并模拟切痂手术及异体网状皮覆盖。各组分别在以下时间点进行取材,模型组12h、24h、48h、72h、96h,切痂组:24h、48h、72h、96h,假手术组:24h、48h、72h、96h,各组每个时相点均为5只。分别取血清使用ELISA检测血清中的LBP、HMGB-1、IL-6、TNF-α、IL-10 炎症因子,Western blot 法检测大鼠肝脏P38MAPK/NF-κB炎症信号通路表达蛋白。2、虽然休克期切痂能够减轻炎症反应,但仍有大量的炎症因子存在于体内,这对于新移植的自体皮肤无疑是有害的,故我们在重度烧伤切痂后进行自体皮片移植同时使用脐带间充质干细胞尾静脉注射,探讨间充质干细胞的炎性调控作用以及对移植皮片的影响,将SD大鼠随机分为模型手术组:30%Ⅲ度烫伤模型后24h进行切痂植皮手术;假烫手术:37℃烫伤后模拟切痂植皮手术;模型手术+hUCMSCs组:模型手术组的基础上组尾静脉注射脐带间充质干细胞(3x106cells/只、1ml);模型手术+SB203580组:尾静脉注射P38MAPK通路抑制剂SB203580(10mg/kg、1ml)。各组分别在术后1d、2d、3d进行取材,分别取血清使用ELISA检测血清中的LBP、HMGB-1、IL-6、TNF-α、IL-10炎症因子,Western blot法检测大鼠肝脏P38MAPK/NF-κB炎症信号通路表达蛋白,台盼蓝染色对移植后的皮肤活性进行鉴定及Western blot检测移植皮片坏死标志蛋白RIP3,HE染色观察移植皮片炎症浸润情况及免疫组化IHC测定皮片中巨噬细胞的极化型态。[结果]1.模型组血清中的LBP、IL-6、TNF-α、IL-10水平约在12h～48h到达高峰后逐渐平稳,HMGB-1逐渐增高,并在96h到达高峰(p<0.01);切痂组及假手术组在同一时相点与模型组比较,除了 LBP以上炎症因子均呈明显的下降(p<0.01)或(p<0.05),肝脏P38MAPK无明显差异、磷酸化P-P38MAPK及磷酸化P-NF-Kb呈明显的下降(p<0.01)或(P<0.05);切痂组组内比较,以上炎症因子及肝脏蛋白磷酸化水平与24h 比较呈明显的下降(p<0.01)或(p<0.05)。2.模型手术+hUCMSCs组可以降低肝脏中P38MAPK和NF-B P65蛋白的磷酸化水平,从而减少炎症反应(p<0.01)或(p<0.05),其作用与SB203580组几乎相同。这些作用可以继续减少炎性因子HMGB-1,IL-6和TNF-α的产生(p<0.01)或(p<0.05),并增加抗炎因子 IL-10(p<0.01)或(p<0.05)。hUCMSCs组皮肤移植物中炎症细胞的浸润明显减少,而hUCMSCs组中的巨噬细胞在3d内极化成抗炎M2方向(p<0.05)。尽管hUCMSCs的免疫调节作用明显,但没能观察到对早期移植皮片活性的影响及程序性坏死标志物蛋白RIP3的变化。[结论]1.休克期切痂能减少炎症因子的产生,且与经典炎症活化通路P38MAPK/NF-κB 有关。2.重度烧伤切痂后机体仍有大量的炎症因子存在,脐带间充质干细胞能够通过P38MAPK/NF-κB炎症通路减轻切痂植皮后的炎症反应,并减少炎症因子的产生及炎症细胞在移植皮片的浸润。