目的:中药肉桂Cinnamomi Cortex为樟科植物肉桂Cinnamomum cassia Presl的干燥树皮。其使用频繁,并且临床应用范围广。现代中药等多方面对其展开了多元化的深入研究,不仅发现肉桂中含有多种类型的化合物成分,还发现其具有多种药理活性。与传统肉桂具有引火归元,补火助阳,温通经脉,散寒止痛的功能,具有治疗腰膝冷痛,阳痿宫冷,痛经经闭,虚阳上浮,肾虚作喘,眩晕目赤,心腹冷痛,虚寒吐泻,寒疝腹痛相比。现代临床研究表明,肉桂具有抗肿瘤、抗炎抑菌、抗氧化、降糖降脂、抗血小板聚集、抑制醛糖还原酶活性等作用。为进一步揭示肉桂具有药理活性的物质基础,寻找活性较强的肉桂化合物,本实验通过多种研究手段对肉桂化学成分进行了系统研究。通过运用气相色谱与质谱联用技术分析对肉桂石油醚部位的化学成分进行定性分析、使用传统分离技术系统分析肉桂乙酸乙酯部位的化学成分。对肉桂甲醇提取部位的化学成分,本实验采用超高压液相与飞行时间质谱联用技术系统分析肉桂药材中的天然活性成分,依据质谱的裂解情况对肉桂甲醇提取部位化学成分进行了定性分析。在此基础上建立一种快速、准确的UPLC-TOF-MS定性分析方法,为进一步探索肉桂的活性成分,从而为肉桂的开发、利用及其药材的质量控制提供科学依据。本论文对肉桂石油醚部位、甲醇提取部位成分进行定性分析,对其乙酸乙酯部位成分进行深入研究,期望能分离得到更多的化合物。方法:1.肉桂石油醚部位成分研究中药肉桂(Cinnamomi Cortex)的石油醚部位化学成分进行研究,利用气相色谱-质谱联用仪对肉桂的石油醚萃取物的成分进行分析,并通过计算机检索相关谱库对其化学成分进行分析和鉴定。2.肉桂乙酸乙酯部位分离及结构鉴定研究将肉桂药材(10 kg)粉碎至粗粉,用8倍量95%甲醇冷浸四次,每次7天;浓缩合并每次的浸提液,浓缩至稠膏状。将浓缩液加入适量水分散,分别用乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取,收集萃取液,减压回收萃取溶剂,最终得乙酸乙酯萃取物,通过进行硅胶柱色谱分离,依次予以不同比例二氯甲烷、甲醇系统按梯度洗脱,对各洗脱部位的化学成分进行系统的研究,采用正、反相硅胶柱反复柱层析、葡聚糖凝胶柱色谱(Sephadex LH-20)及半制备液相色谱,TLC制备薄层等方法进行分离纯化,利用核磁共振光谱和质谱等波谱解析技术结合理化性质鉴定化合物结构。3.肉桂甲醇提取成分定性研究采用UPLC-TOF-MS技术对中药肉桂甲醇提取物中的主要化学成分进行定性分析。使用ACQUITY CSH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.5μm),并以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流速为0.3 m L/min,质谱使用ESI离子源,正负离子模式扫描采集数据。结果:1从肉桂的石油醚萃取物中分离出96个组分,分析鉴定出其中67个化合物,占其气相色谱峰面积的97.202%。用气相色谱峰面积归一化法计算各组分的相对质量分数,肉桂的石油醚萃取物中相对质量分数较高的成分分别是反式肉桂醛(22.07%);甲基环己烷(6.83%);1,1-二甲基环戊烷(5.93%);1,3-二甲基环戊烷(5.29%)。2.从肉桂乙酸乙酯部位中分离获得32个单体化合物,利用现代光谱学技术(UV,IR,HR-ESI-MS,1H-NMR,13C-NMR)鉴定出了其中26个化合物结构。分别鉴定为1-苯基-1,2,3-丙三醇(1,1-phenylpropane-1,2,3-triol)、(-)-(7S,8R)-二羟基去氢二松柏醇(2,(-)-(7S,8R)-dihydrodehydrodi conifery alcohol)、Polystachyol(3)、7,4’-di-O-methyl-(+)-catechin(4)、1-苯基-1,3-丙二醇(5,1-Phenyl-1,3-propanediol)、2,3,4’-三羟基-3’,5’-二甲氧基苯丙酮(6,2,3-Dihydroxy-1-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-1-propanone)、苯乙二醇(7,styrene glycol)、丁香脂素(8,Syringaresinol)、(-)开环异落叶松脂醇(9,(-)-secoisolariciresinol),愈创木基丙三醇-β-松柏醚(10,threo-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-{4-[(E)-3-hydroxy-1-propenyl]-2-methoxyphenoxy}-1,3-propanediol)、甲瓦龙酸内酯(11,Mevalonolactone)、Erythro-1-C-syringylglycerol(12)、苯甲酸甘油-1-酯(13,glycerin-1-benzoatel benzoate)、1,10-Seco-4ξ-hydroxy-muurol-5-ene-1,10-diketone(14)、丁香酸(15,Syringic acid)、浙贝素(16,zhebeiresinol)、2-甲基-3,5-羟基色酮(17,(-)-gynuraone)、反式肉桂酸(18,Cassiferaldehyde)、2-甲氧基肉桂酸(19,2-Methoxy cinnamic acid)、3ξ-(1ξ-Hydroxyethyl)-7-hydroxy-1-isobenzofuranone(20)、肉桂酸(21,cinnamic acid)、4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲醛(22,Syringaldehyde)、松柏醛(23,coniferyl aldehyde)、(-)异落叶松脂素(24,(-)-isolariciresinol)、刺五加酮(25,Ciwujiatone)、Methyl homovanillate(26),其中化合物1、2、5、6、7、9、10、11、12、13、14、16、17、20、25、26共16个化学成分是首次从该植物分离得到。16、17为首次从该属植物中分离得到。3.UPLC-TOF-MS技术定性分析中药甲醇提取结果,利用UPLC的高效分离能力和MS的高灵敏度检测优势,建立了一种基于UPLC-TOF-MS的定性分析方法,通过正负离子质谱信息及元素组成分析,并结合相关文献和对照品数据对照,鉴定出了肉桂甲醇提取物中的29个化合物。新的检测方法为控制肉桂药材饮片的质量、稳定其临床疗效及阐释其作用机制提供了科学依据。结论:本文以中药肉桂为研究对象,针对肉桂的中药化学成分开展肉桂的化学物质基础、快速检测提供方法学借鉴,为中药现代化研究探索可行的技术和方法。通过多种现代仪器检测鉴定中药肉桂中所含有的化学成分,为中药肉桂饮片的真伪鉴别提供了科学依据。