研究目的:1.研究抗胃泌素释放肽前体(pro-gastrin-releasing peptide（31-98）ProGRP（31-98）单克隆抗体D-D3的99Tcm标记方法、标记抗体的稳定性及免疫活性。2.研究⁹⁹Tc^m-D-D₃在正常ICR小鼠及人小细胞肺癌荷瘤裸鼠模型体内的分布情况,探讨⁹⁹Tc^m-D-D₃在小鼠体内药代动力学过程。3.研究⁹⁹Tc^m-D-D₃对不同类型肿瘤的放射免疫显像效果。研究方法:1.通过免疫组化法检测人小细胞肺癌、宫颈癌、胃癌及肺腺癌组织中ProGRP的表达情况。2.采用2巯基乙醇还原法制备标记⁹⁹Tc^m-D-D₃;凝胶柱分离法纯化标记产物;纸层析法检测标记率、放化纯;将⁹⁹Tc^m-D-D₃分别与生理盐水及正常人血清混合后置于37℃水浴箱,分别在不同时间点测定放化纯以了解其稳定性;利用细胞结合分析法测定⁹⁹Tc^m-D-D₃的免疫活性。3.自正常ICR小鼠尾静脉注射⁹⁹Tc^m-D-D₃后,分别于不同时间点采取颈椎脱臼法处死小鼠,同时取血液及各主要脏器组织标本,计算各时间点的每克组织注射百分剂量率（%ID/g）。建立人小细胞肺癌、宫颈癌、胃癌及肺腺癌荷瘤裸鼠模型,采用同样方法,自荷瘤裸鼠尾静脉注射⁹⁹Tc^m-D-D₃后于不同时间点处死荷瘤裸鼠,同时取血液及各主要脏器组织标本,计算各时间点的%ID/g和瘤体/非瘤体组织放射性计数（T/NT）比值。4.对人小细胞肺癌、宫颈癌、胃癌和肺腺癌荷瘤裸鼠模型进行⁹⁹Tc^m-D-D₃放射免疫显像,观察不同类型移植瘤的显像情况,利用ROI技术在显像图上勾画移植瘤轮廓并计算瘤体与对侧相同部位的T/B比值。研究结果:1.免疫组化法检测显示人小细胞肺癌、宫颈癌及胃癌组织切片中有明显的棕黄色颗粒在肿瘤细胞的胞浆内分布,而肺腺癌组织切片中未见明显染色阳性细胞。2.⁹⁹Tc^m-D-D₃标记率为73.87±2.89%,放化纯为94.13±4.49%;与生理盐水混合在37℃水浴箱放置4h后⁹⁹Tc^m-D-D₃放化纯为82.17±1.00%,12h后放化纯为55.73±1.07%;与正常人血清充分混合在37℃水浴箱放置4h后⁹⁹Tc^m-D-D₃放化纯为74.13±1.67%,12h 后放化纯为 54.07±1.88%;99TcM-D-D3 对 NCI-H446 和 A549 细胞株的免疫结合率分别为81.2+2.37%、24.3±1.46%。3.⁹⁹Tc^m-D-D₃在正常ICR小鼠及人小细胞肺癌荷瘤裸鼠体内过程符合抗体在机体内的一般代谢分布规律。主要通过肝脏、肾脏代谢,血液清除速度较快,肌肉及脑组织摄取不明显。注射12h后移植瘤体的%ID/g高于其它脏器及组织,24h时达到最高值0.41±0.04%,T/NT比值随时间延长而逐渐升高,至注射24h时瘤/肌肉的T/NT比值最大达13.67士5.03。4.放射免疫显像结果显示,随时间延长人小细胞肺癌荷瘤裸鼠移植瘤部位放射性浓聚程度逐渐增强,24h时⁹⁹Tc^m-D-D₃聚集最为明显。肺腺癌荷瘤裸鼠移植瘤部位未见明显⁹⁹Tc^m-D-D₃聚集。宫颈癌及胃癌荷瘤裸鼠显像结果和人小细胞肺癌荷瘤裸鼠显像结果类似,但肉眼观察移植瘤部位浓聚99Tcm4-D-D3程度明显低于人小细胞肺癌荷瘤裸鼠。人小细胞肺癌裸鼠模型各时间点T/B比值均高于宫颈癌及胃癌裸鼠模型,三者又均明显高于肺腺癌裸鼠模型。结论:1.99Ttm-D-D3放化纯较高,在体内、体外有一定的稳定性,99Tcm标记后的D-D3仍然保持着较好的免疫活性。2.99Tc-D-D3能选择性浓聚在ProGRP表达阳性的肿瘤部位,对小细胞肺癌有较好的靶向作用;主要通过肝脏及肾脏代谢,血液清除速度较快;瘤体与各主要脏器的T/NT比值随时间延长而逐渐增高,至24h达最高值。3.⁹⁹Tc^m-D-D₃有望成为一种较为理想的小细胞肺癌放射免疫显像剂,值得进一步开展深入的研究。