载有瘦素及血管内皮生长因子的缓释微球水凝胶对放创复合伤促愈作用的体内研究

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研究目的:1.探究载药微球水凝胶对CRWI创面愈合速度的影响;2.探究载药微球水凝胶对CRWI创面胶原纤维的影响;3.探究载药微球水凝胶对CRWI创面愈合相关蛋白质及基因的影响;4.设计一种与本实验涉及的载药微球水凝胶相匹配的给药装置。研究方法1.通过手术后放射的方法,建立小鼠背部皮肤CRWI动物模型;2.建立小鼠CRWI动物模型,设置了3个分组:(a)VEGF/LP(+)组(b)空白微球水凝胶组(c)对照组。分批处死小鼠,HE染色分析创面愈合情况;通过天狼星红染色分析创面Ⅰ/Ⅲ型胶原比例,通过Masson染色分析创面胶原分布;通过免疫组织化学染色检测创面组织中VEGF-A、CD31的表达情况;通过q RT-PCR技术检测创面皮肤组织中愈合相关基因CD31、TGFB1、VEGF-A的表达情况;3.利用Maya 2018软件,设计一种符合本材料临床实际应用的给药装置。结果:1.载有瘦素及血管内皮生长因子的缓释微球水凝胶具有良好的促进创面组织愈合的作用;2.HE染色显示:VEGF/LP(+)组小鼠皮肤组织结构更加有序,毛囊等皮肤附属结构恢复良好,创面组织结构恢复正常,瘢痕组织面积更小;3.天狼星红染色显示:VEGF/LP(+)组Ⅰ/Ⅲ型胶原比例更低,创面瘢痕组织面积更小,形成的胶原纤维组织排列更加有序;4.Masson染色显示:VEGF/LP(+)组创面皮肤组织胶原排列更加有序,新生胶原组织更多,结构更加致密;5.免疫组化染色显示:相比于对照组,VEGF/LP(+)组创面周围毛细血管数量显著增加,创面周围组织VEGF-A表达量显著提高;6.RT-PCR结果显示:相比于对照组,VEGF/LP(+)组创面皮肤组织中愈合相关基因CD31、TGFB、VEGF-A在愈合过程中显著提高;7.成功研制了一种与本文所述温敏型载药微球水凝胶相匹配的具有分类储存功能的注射器。结论:1.载VEGF/LP微球水凝胶具有良好的促进放创复合伤创面组织愈合的功能;2.载VEGF/LP微球水凝胶可以通过促进创面组织微血管形成、胶原分泌促进创面组织愈合;同时可以降低创面组织Ⅰ/Ⅲ型胶原比例,降低创面愈合后瘢痕组织面积;3.成功研制了一种与本文所述温敏型载药微球水凝胶相匹配的具有分类储存功能的注射器。
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