葵灵化积煎对小鼠H22肝癌细胞的抑瘤作用及对C-myc、nm23-H1表达的影响

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目的:癌症目前已经成为了全球的一个主要死亡原因,其中肝癌是最常见的恶性肿瘤之一,对于目前主要的治疗手段手术、放疗及化疗均具有一定的局限性,尤其是具有毒性反应的化疗药物明显降低了癌症患者的生存质量,因此低毒且有效的中药逐渐被人们应用于各种肿瘤的治疗中。本实验通过以氟尿嘧啶为阳性对照,以生理盐水为阴性对照,观察研究葵灵化积煎对肝癌荷瘤细胞系H22小鼠的抗肿瘤作用,并探讨其可能的作用机制。方法:将冻存的肝癌H22细胞株成功复苏后在昆明小白鼠体内进行传代,无菌环境下抽取小鼠腹水,并稀释调整细胞至5x10个·mL1浓度,分别取0.1mL悬液注射在64只6~8周龄,体重20±2g的昆明小鼠右腋下,建立肝癌实体瘤模型进行体内实验。随机将昆明小鼠分为对照组(0.85%生理盐水0.4mL/只)、5-Fu组(氟尿嘧啶20mg·kg-1)、中药组(葵灵化积煎0.4mL/只)及联合组(葵灵化积煎0.2mL/只+氟尿嘧啶10mg·kg-1)4组,每组16只,雌雄各8只。分别用灌胃或腹腔注射的方式每天给4组小鼠进行药物治疗,在连续给药治疗期间,观察并记录各组小鼠生存状态的变化,14天后以颈椎脱臼法处死小鼠,剥取移植瘤,拍照并对其称重,通过比较移植瘤的体积、重量、计算抑瘤率,观察葵灵化积煎对肝癌细胞的抑制作用,并采用免疫组织化学技术检测葵灵化积煎对C-myc、nm23-H1表达的影响。结果:在小鼠用药治疗期间,通过对其精神状态、呼吸频率、毛发色泽、体形、食量及活动灵敏程度等指标的观察,发现随着用药时间的延长,中药组的小鼠生存质量优于联合组及5-Fu组的小鼠。通过比较4组小鼠移植瘤体积的大小,可以明显观察到5-Fu组、中药组及联合组小鼠移植瘤的体积均小于对照组,其中抑制肿瘤生长最明显的是5-Fu组,联合组较中药组抑瘤效果明显。从移植瘤重量上看,5-Fu组、中药组及联合组小鼠的瘤重亦明显低于对照组,差异有统计学意义(**P﹤0.01,*P﹤0.05),各自对小鼠肝癌细胞的生长抑制率分别为5-Fu组50.23%,联合组36.41%,中药组29.03%。从免疫组织化学结果可观察到C-myc及nm23-H1在4组中均呈阳性表达,用方差分析统计结果显示:葵灵化积煎能减弱C-myc的表达,增强nm23-H1的表达,与对照组相比较差异均有统计学意义(△P﹤0.05),而5-Fu组、联合组及中药组三组两两比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论:葵灵化积煎同氟尿嘧啶都具有明显的抑制肿瘤生长的作用,其作用机制可能与调节C-myc及nm23-H1表达有关;此外,葵灵化积煎的毒性作用远低于氟尿嘧啶,可提高癌症患者的生存质量,延长癌症患者的生存期;因此,从远期的疗效看,有效且低毒的药物葵灵化积煎可作为治疗肝癌的新药物。但是本实验对葵灵化积煎只是初步阐明抗肿瘤的可能机制,其明确的作用机制还有待于进一步深入探讨与研究。
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