论文部分内容阅读
目的：本课题旨在通过建立动物模型,研究甲地海因溶液和人工硬脑膜对脊髓栓系松解术后硬脊膜内脊髓、神经根粘连的预防作用,为探索临床应用奠定实验基础。方法：1.将60只雌性Wistar大鼠体重230—270克,按体重随机分为4组：甲地海因溶液组(A)、人工硬脑膜组(B)、甲地海因溶液+人工硬脑膜组(C)、生理盐水对照组(D)；2.全部动物先分别行耻骨上膀胱造瘘,术后1周行尿流动力学和肌电图检查；检查结束后2-3天行二次手术,以L3为中心,依次切开各层,硬脊膜开窗约0.3cm×0.1cm大小；A组在缺损处涂布甲地海因溶液0.5ml,B组覆盖人工硬脑膜,C组覆盖侵泡甲地海因溶液的人工硬脑膜,D组涂布生理盐水0.5ml。各组随机选取5只大鼠分别于第二次术后1周,4周,8周进行尿流动力学和肌电图检查,然后处死大鼠,依次打开各层,按照Rydell分级标准,观察硬脊膜内脊髓、神经根粘连情况；分别取出整块L2-L4节段脊柱标本,行常规脱钙、脱水、透明及石蜡包埋,5um连续切片,HE染色,根据改良Nussbaum组织学评分,光镜下观察硬脊膜内粘连情况,所有大鼠依据Tarlov评分标准对后肢行为学功能评价。各处理组与对照组比较采用方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果：1.大体标本观察：二次术后1周,各组硬膜内可见稀疏而散在的膜性粘连,瘢痕组织与硬膜囊易钝性分离,硬膜囊光滑、完整,Rydell分级主要为0～Ⅰ级,各组间相比无显著性差异(P>0.05,表1)。4周时,D组硬膜内瘢痕组织致密,粘连广泛,瘢痕组织与硬膜囊不易钝性分离,分离后硬膜囊多完整,Rydell评分集中在Ⅰ～Ⅱ级；A、B、C组评分主要为0～Ⅰ级,与D组比较差异均有统计学意义(P<0.05)；A组与B、C组之间,B组与C组相比均无统计学意义(P>0.05)。8周时,D组硬膜内瘢痕组织致密,粘连广泛,瘢痕组织与硬膜囊不易钝性分离,分离后硬膜囊难以保持完整,Rydell分级主要为Ⅱ-Ⅲ级；A、B、C组相比粘连程度较轻,B、C组与D组差异均有统计学意义(P<0.05)；但A组与D组,B组与C组之间相比无统计学意义(P>0.05)。2.病理切片HE染色观察：光镜下观察,二次术后1周时,脊髓粘连面积<25%,脊髓外胶原稀疏,瘢痕和移植物无明显侧方及后方延伸,各组Nussbaum组织学评分均为0级(见图1),相比差异无统计学意义(P>0.05,表2)。4周时,D组脊髓粘连面积25%-50%,硬脊膜内脊髓、神经根粘连,胶原较致密,瘢痕侧方延伸达脊髓与椎板缺损之间,或部分嵌入椎板缺损,但未压迫脊髓,评分为Ⅰ级(见图2),A、B、C组粘连程度较轻,与D组有显著性差异(P<0.05)；A组与B、C组,B与C组之间无统计学意义(P>0.05)。8周时,脊髓粘连面积>50%,脊髓外胶原致密,瘢痕包绕或伸达一侧或双侧神经根,或瘢痕嵌入椎管,脊髓受压变形,硬脊膜内脊髓、神经根粘连,评分为Ⅱ级(见图3),B、C组与D组相比粘连程度较轻,差异有统计学意义(P<0.05)；A组与B、C组,B与C组之间亦有统计学意义(P<0.05)。3.后肢行为学功能评价：一次术后1周,所有实验动物行走未见明显异常,评分为5级；二次术后1周,各组大鼠Tarlov评分为4～5级,各组之间相比差异无统计学意义(p>0.05,表3)。术后4周,各组均出现不同程度的瘫痪,后肢活动频繁或有力,不能负重,Tarlov评分为2～3级,A、B、C组瘫痪程度与D组相比程度较轻,差异存在统计学意义(p<0.05)；A组与B、C组,B组与C组之间无统计学意义(P>0.05)。8周时,D组大鼠肌力的下降呈进行性加重的趋势,严重瘫痪,后肢可见轻微活动但不能做类似爬行的动作,且伴有溃疡,Tarlov评分为1～2级,A、B、C组与D组相比瘫痪程度轻,差异有统计学意义(p<0.05)；A组与B、C组,B、C组之间差异亦有统计学意义(P<0.05)。4.尿流动力学研究：第一次术后,比较各组之间的膀胱容量,逼尿肌压及顺应性,差异无统计学意义(p>0.05,表4)。二次术后第1周,膀胱容量增加,顺应性降低,逼尿肌压力增加,各组与术前,各组间相比无显著差异(P>0.05)。术后4周时,D组与A、B、C组相比,膀胱容量增加明显,顺应性降低,逼尿肌压力增加,有显著性差异(P<0.05),A组与B、C组,B组与C组相比差异无统计学意义(P>0.05)。二次术后第8周,A、B、C组与D组相比存在显著性差异(P<0.05)；A组与B、C组,B组与C组相比差异亦有统计学意义(P<0.05)。5.体感诱发电位研究：第一次术后各组N17潜伏期,P40波幅无显著差异(P>0.05,表5)。二次术后1周时各组与术前相比,N17潜伏期延长,P40波的波幅降低,有显著差异(P<0.05),各组间相比无显著差异(P>0.05)。4周时,A、B、C组与D组存在显著性差异(P<0.05)；A组与B、C组,B组与C组相比差异亦有统计学意义(P<0.05)。术后8周,A、B、C组与D组存在显著性差异(P<0.05),A组与B、C组相比差异亦有统计学意义(P<0.05),B组与C组差异有统计学意义(P<0.05)。结论：甲地海因溶液对脊髓栓系松解术后早期硬脊膜内粘连疗效明显,长期疗效需要进一步研究；人工硬脑膜可以有效预防硬脊膜内瘢痕粘连,甲地海因溶液联合人工硬脑膜预防粘连的作用显著,将来对指导临床用药具有一定的意义。