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目的: 以动脉粥样硬化(AS)为主要特征的糖尿病大血管并发症，是糖尿病致残、致死的最主要原因。目前动脉硬化发病机制尚未完全明了。AS的发生是一个多种因素在多层次上综合作用的过程。血脂水平的升高伴随着促炎因子的表达和免疫反应的激活，单核细胞活化成为巨噬细胞，血管壁脂质过氧化导致大量ox-LDL生成，巨噬细胞通过吞噬ox-LDL伴随一系列信号分子的表达导致脂质代谢的障碍，并最终形成泡沫细胞。泡沫细胞的形成是AS早期变化的特征性标志，巨噬泡沫细胞的形成及凋亡是动脉粥样硬化斑块损伤形成、发展和崩解的关键。因此探讨影响巨噬泡沫细胞的形成和凋亡的影响因素作为AS治疗的新策略日益受到重视。 本研究以小鼠RAW264.7巨噬细胞为研究对象，通过ox-LDL诱导构建巨噬细胞源泡沫细胞，探讨还原型β2糖蛋白Ⅰ(R-β2GPⅠ)和β2GPⅠ对AS过程中泡沫细胞形成的影响，以及其可能机制。 方法: 1.构建RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞模型，探讨OX-LDL诱导泡沫细胞的合适浓度。巨噬细胞在不同浓度的氧化型低密度脂蛋白溶液内孵育24h，高压液相联合质谱法(HPLC-MS)测定细胞内总胆固醇的含量，MTT法检测细胞生长活力。 2.RAW264.7巨噬细胞培养并分四组:①对照组:不加干预因素;②泡沫细胞组:加入80mg/Lox-LDL;③β2GPⅠ组:加入80mg/Lox-LDL和100mg/Lβ2GPⅠ;④还原型β2GPⅠ组:加入80mg/Lox-LDL和100mg/L还原型β2GPⅠ。共同孵育24h后，用油红O染色观察细胞形态，HPLC-MS法检测细胞内胆固醇含量，流式细胞技术检测细胞凋亡率研究还原型β2GPⅠ和还β2GPⅠ对巨噬细胞源性泡沫细胞脂质蓄积和细胞凋亡的影响。 3.应用实时定量PCR法研究还原型β2GPⅠ和β2GPⅠ对ox-LDL诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞形成中 CD36、SR-B1、ABCA1、ABCG1等脂代谢相关受体mRNA表达的影响。 4.采用Western Blot技术检测还原型β2GPⅠ和β2GPⅠ对ox-LDL诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞形成中p38MAPK、JNK/MAPK信号转导通路及其下游促凋亡蛋白关键酶caspase9、caspase3表达的影响。 结果: 1.随着ox-LDL浓度升高，巨噬细胞内的胆固醇含量逐渐增加。ox-LDL超过25mg/L时细胞活力逐渐下降。ox-LDL浓度在80mg/L时构建的泡沫细胞内总胆固醇含量适度，油红0染色可见细胞内存在大量脂滴，HPLC-MS检测总胆固醇/胆固醇酯超过50％。细胞活力下降近50％。 2.细胞油红O染色、细胞内胆固醇含量检测显示:β2GPⅠ组和还原型β2GPⅠ组巨噬细胞内胆固醇含量明显低于泡沫细胞组(P＜0.05，P＜0.01)，还原型β2GPⅠ组胆固醇酯/总胆固醇(CE/TC)比值较β2GPⅠ组和泡沫细胞组均有降低(P＜0.05，P＜0.01)，且还原型β2GPⅠ组胆固醇含量及CE/TC比值较β2GPⅠ组更为减低（P＜0.05， P＜0.01）。说明还原型β2GPⅠ能够抑制氧化脂质诱导的泡沫细胞形成，其作用比β2GPⅠ组显著。 3.流式细胞技术检测细胞凋亡率结果显示:泡沫细胞组细胞凋亡率对照组显著增加（P＜0.01）;β2GPⅠ组和还原型β2GPⅠ组的细胞凋亡率较泡沫细胞组均明显下降（P＜0.05，P＜0.01;）;总细胞凋亡率较β2GPⅠ组明显下降(P＜0.05)。 4.Real-time PCR显示还原型β2GPⅠ和β2GPⅠ组较泡沫细胞组巨噬细胞内CD36mRNA明显下降(P＜0.05或P＜0.01)。还原型β2GPⅠ组CD36mRNA较β2GPⅠ组下降更明显（P＜0.05）。而且还原型β2GPⅠ较泡沫细胞组降低ABCA1mRNA表达(P＜0.05)。β2GPⅠ组ABCA1与泡沫细胞组无明显差异。各组的ABCG1 mRNA、SR-B1mRNA水平无明显差异。 5.Western blot检测结果，ox-LDL能够促进P38MAPK通路磷酸化并激活其下游促凋亡的蛋白关键酶caspase9、caspase3表达，而还原型β2GPⅠ与泡沫细胞组相比可以明显下调P38MAPK通路、JNK/MAPK通路的磷酸化水平并抑制caspase9、caspase3的表达（P＜0.05），从而起到对抗巨噬细胞凋亡的作用。与泡沫细胞组相比，β2GPⅠ可以下调JNK/MAPK通路，而对P38MAPK通路的作用没有明显差异。 结论: 1.以Ox-LDL诱导小鼠RAW264.7细胞成功构建巨噬细胞源性泡沫细胞。方法简单简单，可重复性好，成模率高。为体外研究动脉硬化的机制及防治提供了良好的平台。 2.还原型β2GPⅠ和β2GPⅠ能够抑制ox-LDL诱导的泡沫细胞形成，还原型β2GPⅠ作用比β2GPⅠ更为显著。 3.还原型β2GPⅠ和β2GPⅠ能够抑制ox-LDL诱导的泡沫细胞凋亡，还原型β2GPⅠ作用比β2GPⅠ更为显著。 4.还原型β2GPⅠ和β2GPⅠ能够通过减少CD36mRNA水平来减少胆固醇的摄入抑制巨噬细胞内胆固醇的蓄积，防止泡沫细胞形成和凋亡。而还原型β2GPⅠ这一作用更为明显。 5.还原型β2GPⅠ在ox-LDL诱导巨噬细胞泡沫化中下调P38/MAPK通路、JNK通路的磷酸化水平，并抑制其下游的caspase9-caspase3蛋白表达。