本研究目的是实现条斑紫菜TPS基因（PyTPS）的高效原核表达并纯化出重组蛋白，为研究重组蛋白的TPS与TPP酶活性奠定基础;同时实现PyTPS基因片段的高效原核表达并纯化重组蛋白，为利用重组蛋白作抗原制备抗血清并进行转基因植株中PyTPS基因表达的ELISA检测奠定基础。主要结果如下:　　 1、克隆了PyTPS基因1.3Kb的片段。　　 从条斑紫菜叶状体提取总DNA并作模板，通过PCR扩增获得了PyTPS基因的1.3Kb特异性扩增带。回收约1.3Kb的特异扩增片段，然后进行T-A克隆。经PCR检测及NdeⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ限制性酶切鉴定，筛选出了阳性克隆，其重组质粒被命名为pGEM-PyTPS-1.3。序列测定结果表明pGEM-PyTPS-1.3中的插入片段就是PyTS基因1.3Kb片段，长1359bp，编码453个氨基酸，推导表达产物为51KDa。　　 2、实现了PyTPS基因的原核表达，并从包涵体中纯化出了目的蛋白。　　 工程菌载体BL21（pET-PyTPS）在37℃，用1mMIPTG诱导培养5小时后，SDS-PAGE显示蛋白图谱上有一条约100kDa的诱导表达的蛋白条带，其大小与预期的融合蛋白相符。用溶菌酶裂解菌体，提取总蛋白，SDS-PAGE显示表达的融合蛋白主要以包涵体的形式存在。对包涵体中的目的蛋白用镍离子亲和层析柱进行了纯化，得到了高纯度的目的蛋白，复性后可以可以用于酶活性的检测。　　 3、从上清中纯化出了水溶性目的蛋白。　　 工程菌载体BL21（pET-PyTPS）经诱导表达后，提取菌体蛋白，电泳显示上清中也有目的蛋白。上清经过浓缩后，可纯化出的水溶性的目的蛋白且纯度很高，直接用于酶活性的检测。　　 4、实现了PyTPS基因1.3Kb片段的原核表达，并对纯化条件进行了研究。　　 以pBAD/Thio-TOPO为起始载体，构建了PyTPS基因1.3Kb片段的原核表达载体pBAD-PyTPS-1.3。工程菌TOP10（pBAD-PyTPS-1.3）在37℃、用0.2％阿拉伯糖诱导培养4小时后，SDS-PAGE显示蛋白图谱上有一条67kDa的诱导表达的蛋白条带。用含20mM咪唑作的结合缓冲液与洗涤液进行镍离子亲和层析可获得目的蛋白，但仍含有杂蛋白。在实现原核表达的情况下，可切取含目的蛋白胶条作抗原制备抗血清。