精原干细胞(spermatogonial stem cells，SSCs)足唯一能将遗传信息传递给后代的成体干细胞。开展SSCs的研究对于精子发生机理研究、遗传性疾病治疗、转基因动物生产及多潜能干细胞制备具有十分重要的意义。然而，SSCs在小鼠睾丸组织中含量甚微(约1／3，000-4，000个睾丸细胞)，对SSCs的进一步研究应用受限于SSCs的细胞数量及体外存活时间，因此，SSCs自增殖机制的阐明成为目前亟需解决的问题。近来研究表明，Bmil和Piwi基因与干细胞自增殖密切相关，然而上述基因对SSCs体外增殖是否有影响?国内外均未见报道。因此，本研究从小鼠睾丸组织中克隆了Bmil和Piwi基因，制备了rBMI1多克隆抗体，利用免疫学检测、原位杂交及流式细胞分选技术等对Bmil基因在睾丸组织中的表达进行了深入的研究，构建了Piwi基因真核表达载体、Bmil真核表达载体和RNAi载体，通过转染培养的SSCs，探讨了Bmil和Piwi基因对SSCs增殖的影响。本研究首次发现并从不同角度证实了Bmil基因表达于SSCs，作用于生精过程的起始阶段；发现Bmil基因的过表达对SSCs的增殖有显著促进作用(P＜0.01)，抑制Bmil基因的表达会导致SSCs的增殖受阻(P＜0.01)，即Bmil基因是SSCs自增殖的关键调控因子；发现Piwi基因的过表达对SSCs的增殖有显著促进作用(P＜0.01)。不同浓度载体转染的比较结果表明，当pcDNA3.1／Myc-His-Bmil和pcDNA3.1／Myc-His-Piwi载体终浓度分别为2.4μg／ml、2.8μg／ml时，促进SSCs增殖效果最佳。本研究为SSCs自增殖机制的阐明及SSCs批量培养体系的构建奠定了基础，本论文对其它干细胞的研究也具有借鉴意义。