决明子鉴别及其主要有效成分含量测定的研究

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决明子是国家卫生部公布的药食同源的物质之一,为豆科植物钝叶决明(Cassiaobtusifolia L.)或小决明(Cassia tora L.)的干燥成熟种子,具有降血压、降血脂、明目、抑菌等功效。对于决明子的鉴别,《中华人民共和国药典》(2005年版,一部)仅以大黄酚、大黄素作为理化鉴别指标,无法体现决明子中其他蒽醌、蒽醌苷、萘并吡喃酮类等药效成分的存在,因此仅以大黄酚、大黄素作为决明子的鉴别指标难以全面反映决明子的药用成分及质量优劣。为此,有必要建立能较为全面反映决明子中化学成分与药理作用关系的鉴别方法。基于多维多息指纹图谱可以较为全面控制中药质量的理论,本课题拟建立一种能较全面地反映决明子中理化成分和药效信息的“全指纹图谱系”,以此用于决明子的鉴别。本课题以中医药理论和现代药理研究为指导,按决明子药材中所含有效成分的极性不同,分别用甲醇和氯仿提取,分别采用薄层色谱-光谱联用、高效液相色谱法得到能体现两个有效部位不同药效信息的指纹图谱,同时用HPLC法测定了氯仿提取物中大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量。与现行的中国药典(2005年版,一部)有关决明子理化鉴别和含量测定方法相比,本课题的研究结果较为全面地体现了决明子药材化学成分的整体性和复杂性,为合理控制其质量提供参考。课题研究分以下三部分内容:一.采用薄层色谱法分别对决明子的甲醇提取物和氯仿提取物进行鉴别。经TLC分离后,从氯仿提取物中得到5个分离良好的斑点,其中3个斑点与大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照品的比移值及荧光颜色相同。实验结果表明,所建立的决明子中氯仿提取物的TLC鉴别方法不但能准确地鉴别决明子氯仿提取物中的三种游离蒽醌类成分,还反映了决明子中其他两种脂溶性成分的存在。对甲醇提取物进行TLC分离后,得到8个分离良好、颜色不同的斑点,并以紫外光谱法及荧光光谱法进一步表征了各斑点的光谱特征,初步证实了决明子甲醇提取物中含有蒽醌苷类和萘并吡喃酮类成分。二.建立了决明子甲醇提取物的HPLC指纹图谱。在建立其HPLC指纹图谱过程中,采用大孔树脂去除样品中的糖类等大分子水溶性杂质,所建立的指纹图谱精密度、稳定性、重现性较好。在甲醇提取物的指纹图谱中标定了17个共有峰,采用SPSS软件和“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”软件处理数据,系统聚类分析结果与相似度分析结果基本一致,直观地反映出了14批不同产地及批次的决明子之间极性较大成分的差异。三.按中国药典(2005年版,一部)方法将决明子药材酸水解后用氯仿提取,建立了该提取物的HPLC指纹图谱,同时以大黄素、大黄酚、大黄素甲醚为对照品,进行了三种成分的含量测定。14批不同产地及批次的决明子药材含量测定结果及指纹图谱的相似度评价结果表明,HPLC指纹图谱技术结合多指标成分定量用于分析决明子药材的脂溶性成分,可以更为客观、全面地评价其质量。多维指纹图谱的优势在于采用多种分析仪器联用的模式来分析中药的化学成分,中药“全指纹图谱系”则是根据每一类成分的理化性质采用合理的提取方法和分析方法制定相应的指纹图谱,以求全面反映中药质量信息。本文采用薄层色谱-光谱联用和高效液相色谱法建立了决明子甲醇提取物、氯仿提取物的指纹图谱,为决明子多维多息指纹图谱和“全指纹图谱系”的建立提供了参考,为决明子的质量评价提供了科学依据。
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