热休克条件下诱导型HSP70对人胚肺二倍体细胞衰老的影响

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目的:探讨在热休克条件下,人胚肺二倍体细胞MRC-5株诱导型热休克蛋白70(HSP70)在细胞水平的表达机制,以及对MRC-5细胞衰老的影响。 方法:用热休克处理诱导MRC-5细胞HSP70的表达,同时采用HSP70反义寡核苷酸转染MRC-5细胞做对照,分别置42℃恒温水浴30min、1h、2h、4h,及每日水浴1h共3d和5d,各组细胞均在37℃复温,于复温后4h固定。流式细胞仪测定诱导型HSP70的表达及细胞凋亡,黄嘌呤氧化酶法测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)总活力,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色及显微镜观察并采图。 结果:(1)在热休克条件下的不同时相,MRC-5细胞诱导型HSP70的表达随热处理时间延长而增加,且均高于同时间点对照组水平,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)在热休克条件下的不同时相,MRC-5细胞SOD总活力随热处理时间延长而增高,均高于同时间点对照组水平,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)经反义寡核苷酸处理的细胞,在热处理第三天及第五天,β-半乳糖苷酶染色阳性表达率高于实验组。 结论:热处理方法可成功诱导MRC-5细胞表达HSP70,随热处理时间延长,MRC-5细胞诱导型HSP70表达增加,诱导型HSP70可能通过增强细胞内源性抗氧自由基能力,影响MRC-5细胞的衰老进程。
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