我国海水养殖业的迅猛发展,带来了巨大的社会效益和经济效益,同时也面临了诸如养殖病害频发、海水养殖动物生长缓慢、沿海水质恶化等一系列问题,成为制约水产养殖业健康发展的瓶颈。海洋动物源饲用益生菌以其促进养殖动物生长、提高养殖动物免疫功能、防病抗病力、且无污染、无毒害等特点,逐渐成为水产养殖应用的新焦点。源自杂色鲍(Haliotis diversicolor)肠道的两株细菌,同温层芽孢杆菌(Bacillus stratosphericus A3440)和海洋褐色杆菌(Phaeobacter daeponensis AP1220),因其分别具有显著的消化酶活性和抗菌活性,作为潜在益生菌开展了初步应用研究。本论文初步测试了两株菌的安全性、对其培养基成分和培养条件进行了优化、并将其应用于杂色鲍幼鲍的养殖实验中,明确促生抗病效果并就益生菌对肠道菌群结构的影响进行了深入分析,为益生菌在杂色鲍养殖中的进一步应用和深入研究提供了理论依据。首先,对两株潜在益生菌的安全性及菌间相容性进行研究。结果表明,A3440对28种抗生素中的16种表现敏感、AP1220对13种抗生素表现敏感。AP1220可以有效抑制20株指示菌中的16株。两株菌均不会产生溶血素、不具有氨基酸脱羧酶和硝基还原酶活性。在菌液浓度为105cfu/mL时,两株菌不会相互抑制。其次,对两株潜在益生菌的培养基成分和发酵条件进行了优化。以细菌芽孢产率和蛋白酶活力作为检测指标,对菌株A3440进行优化。结果显示,优化后A3440的蛋白酶活力从166.66 U提高至294.44 U、芽孢率从86.7%提高至94.3%。以OD630值和抑制哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)的能力对菌株AP1220进行优化。结果显示,优化后AP1220的OD630值从0.83提高至1.10、抑菌直径从1.62 cm提高至 1.75 cm。第三,探究了两株潜在益生菌对杂色鲍的益生作用。结果显示,日粮中添加了 A3440,显著提高了幼鲍的壳长增长率、体重增长率、胰蛋白酶活力、4种体液免疫酶活力(P<0.05);添加AP1220显著提高了体重增长率、酸性磷酸酶和过氧化氢酶的活力(P<0.05),并在弧菌攻毒实验中使幼鲍存活数量对比无益生菌添加的对照组提高了 45.65%。添加了两株菌的实验组,生长指标、淀粉酶和3种体液免疫酶活力显著高于对照组(P<0.05)。最后,研究了两株潜在益生菌对杂色鲍肠道菌群结构的影响。两株菌在饲喂后,宿主肠道微生物群落结构与对照组相比并未发生显著性变化。但攻毒后,益生菌组肠道菌群多样性和丰度均有不同程度提高,但群落整体结构上并未发生显著性变化;而对照组菌群多样性和丰度显著性降低,且群落结构明显变化;同时一些肠道有益菌群在益生菌组也显著性增高(P<0.05),而有害或机会细菌菌群丰度降低。进一步表明,益生菌通过维持或重建肠道中健康的微生物群落结构,而达到有效的益生效果。