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目的:研究马红丸含药血清对人肝癌smmc-7721细胞增殖的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法:采用血清药理学通法制备空白血清、马红丸和阿霉素(多柔比星)含药血清,作用于smmc-7721细胞。(1)MTT法检测空白血清,马红丸和阿霉素含药血清对smmc-7721细胞增殖的影响;(2)测定马红丸和阿霉素含药血清作用后smmc-7721细胞LDH的释放量;(3)Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡的情况;(4)用流式细胞技术检测细胞的凋亡率;(5)TRAP-PCR银染法检测细胞端粒酶活性;(6)RT-PCR法测定细胞中bcl-2及bax mRNA水平的改变情况。结果:(1)不同体积分数(10%,20%,30%)的马红丸和阿霉素含药血清作用24,48,72小时后,对细胞增殖的抑制作用呈现时间和剂量依赖性;其中以30%马红丸和阿霉素含药血清作用72小时抑制率最大(p<0.01);(2)与30%空白血清组相比,30%马红丸和阿霉素含药血清作用细胞72小时后,释放到细胞培养液上清中的LDH含量差异具有统计学意义(p<0.01);(3)Hoechst 33258荧光染色镜下观察结果显示,正常对照组与空白血清组细胞的结构完整,荧光均匀分布,而30%马红丸和阿霉素含药血清处理细胞72小时,出现细胞核浓染和核碎裂;流式细胞仪检测结果表明,与30%空白血清组相比,30%马红丸和阿霉素含药血清处理组细胞的凋亡率差异具有统计学意义p<0.01);(4)TRAP-PCR银染法结果显示,30%空白血清组与正常对照细胞端粒酶活性无明显差异,而与30%空白血清组相比,30%马红丸含药血清和阿霉素含药血清作用细胞72小时后,端粒酶活性降低;(5)RT-PCR结果表明,30%空白血清组与正常对照组细胞中bcl-2和baxmRNA水平改变无明显差异,而与30%空白血清组相比,30%马红丸和阿霉素含药血清明显下调细胞中bcl-2 mRNA水平,上调bax mRNA水平p<0.01)。结论:(1)30%马红丸含药血清作用于人肝癌smmc-7721细胞72小时,可明显抑制细胞的增殖;(2)30%马红丸含药血清能够诱导人肝癌smmc-7721细胞发生凋亡;(3)马红丸含药血清的抑制人肝癌smmc-7721细胞的作用可能是通过抑制端粒酶活性,并下调细胞中bcl-2 mRNA水平,上调bax mRNA水平来实现的。