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研究背景:动脉瘤性蛛网膜下腔出血是一种急重症神经系统疾病,致残率和死亡率高。且发病年龄较其他类型卒中患者低,对社会造成经济负担重。近年来,不断提升的诊断水平,动脉瘤破裂的早期修复,尼莫地平的应用以及先进的神经重症监护系统,使蛛网膜下腔出血患者的死亡率大大下降。近年来提出早期脑损伤的概念,指蛛网膜下腔出血后72小时内各种病理生理变化对脑组织的损伤作用。且认为早期脑损伤与预后关系密切,对其早期干预可以大大提高治疗效果和改善预后。因此,对于早期脑损伤的早诊断、及时治疗尤为重要。现由于缺乏相应的特异性标记物,难以对早期脑损伤进行诊断。因此,寻找一种特异性标志物具有十分重要的意义。研究目的:通过耳正中动脉-颅内转流构建兔的SAH模型,并通过该模型探讨蛛网膜下腔出血后脑组织以及脑脊液中Ngb以及LCN-2浓度变化趋势。研究方法:1将新西兰白兔随机分为假手术对照组(n=16)和SAH组(n=25)。SAH组采用兔耳正中动脉转流至视交叉池的转流方法来建立SAH模型。观察ICP、r CBF。利用干湿重法检测脑组织含水量、伊文思蓝染色法检测血脑屏障通透性。CT平扫观察兔建模前后颅内情况。HE染色、尼氏染色观察脑组织切片。2选取新西兰白兔76只,按照随机数字表法分为假手术对照组、SAH3h组、SAH6h组、SAH12h组、SAH24h组、SAH48h组、SAH72h组各8只,CSF组20只。假手术对照组及SAH各组,在各时间点取脑,通过western blotting的实验方法,检测了在SAH前后各时间点,兔脑组织中Ngb、LCN-2含量的变化。CSF组在建模前及建模后3小时、6小时、12小时、24小时、48小时及72小时,取脑脊液,通过ELISA法检测动态观察脑脊液中Ngb、LCN-2、TNF-α及IL-6浓度变化。研究结果:1建立兔耳正中动脉-视交叉池SAH模型,该模型建立过程中ICP升高、r CBF降低。神经行为学评分建模前2分,24小时候增高为4.9±0.47,表现为进食量有不同程度减少,出现精神萎靡、毛发杂乱等症状。在48小时及72小时,分别是5.4±1.02及5.6±0.8,此时进食量减少更为明显,部分出现昏迷等神经功能障碍。SAH24小时组脑组织含水量与假手术组相比明显增高(p<0.05)。SAH24小时组脑组织EB含量与假手术组相比明显增高(p<0.05)。CT平扫示建模后视交叉池部位有气泡影,示转流管置入预期部位。病理染色示SAH组有脑损害,对照组无脑损害。2 western blotting检测兔SAH后,脑组织中Ngb变化,示其进行性增高,于24小时达高峰,随后在48小时后缓慢下降。其中SAH3h组、SAH6h组、SAH12h组、SAH24h组、SAH48h组及SAH72h组与对照组相比均具有统计学差异(p<0.05)。而在兔SAH前后,脑脊液中Ngb的浓度具有相似变化趋势。6小时渐增高,24小时达高峰,48小时、72小时稍有下降,但仍维持在较高水平,。其中SAH6h组、SAH12h组、SAH24h组、SAH48h组及SAH72h组与对照组相比具有统计学差异(p<0.05),SAH3h组与对照组相比没有统计学差异(p>0.05)。western blotting检测兔SAH后,脑组织中LCN-2含量24小时增高,48小时达高峰,后缓慢下降。ELISA法检测兔SAH前后,脑脊液中LCN-2浓度有相似变化趋势。SAH前后脑脊液中TNF-α渐增加,72小时达高峰。SAH前后脑脊液IL-6渐增加,72小时达高峰。结论: 1本研究通过构建了兔耳正中动脉-视交叉池转流的SAH模型,并通过测量颅内压、局部血流量等指标,证明该模型能模拟蛛网膜下腔出血早期脑损伤中颅内压的升高、脑灌注紊乱、血脑屏障的破坏以及脑水肿以等病理生理变化。能作为早期脑损伤研究的模型。2经Western blotting验证蛛网膜下腔出血后脑组织中Ngb、LCN-2含量在24小时及48小时达到高峰,且能从脑脊液中通过ELISA方法检测出来,这说明Ngb、LCN-2作为生物标志物,是可以通过抽取脑脊液这种简便方法进行验证,具有可行性。