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金银花是一种传统中药材,有清热解毒的作用。现代研究表明,金银花的花和叶中含有的绿原酸、黄酮等成分,具有清除体内超氧离子自由基,保护组织免受氧化应激损伤的作用。为了观测金银花绿原酸提取物对肉牛的抗热应激效果,本研究开展了以下三部分试验:(1)金银花的花和叶中绿原酸超声提取工艺及参数优化。(2)金银花绿原酸提取物对肉牛的抗热应激作用。(3)金银花绿原酸提取物对热应激肉牛抗氧化酶表达的影响。试验一:采取超声波技术,通过单因素试验对提取参数(包括超声功率、超声时间、溶剂浓度、提取温度、料液比)进行初筛,选择各因素中提取效果较好的2个水平;然后采用正交试验设计(L827)对提取参数进一步优化。结果表明:金银花的花和叶中绿原酸的最佳提取条件均为料液比1:35,乙醇浓度70%,超声时间45min,超声功率300 w,超声温度70℃;在此参数条件下,金银花的花中绿原酸得率为55.25 mg/g,叶中绿原酸得率为28.80 mg/g。试验二:选择体重360±20 kg的健康锦江黄牛20头,分为0.0%、0.2%、0.4%和0.6%金银花绿原酸提取物添加组,每组5头牛。试验牛均饲喂于夏季高温条件下,试验包括预试期10d,正试期60 d。正试期间,观测每日早中晚牛舍温度和相对湿度,并在第20 d、40 d、60 d测定供试牛的体温、呼吸频率和血清生化指标。结果显示:1)夏季高温环境下,牛舍平均温湿指数高于79,肉牛处于热应激状态。2)体温:在第40 d,0.2%和0.6%金银花提取物添加组试验牛的体温显著低于对照组(P<0.05),其他各组各阶段均无显著差异(P>0.05)。3)呼吸频率:与对照组相比,0.2%添加组试验牛的呼吸频率在4160 d显著降低(P<0.05);0.6%添加组试验牛的呼吸频率在2140 d和4160 d均显著降低(P<0.05)。4)血液生理生化指标:与对照组相比,金银花提取物组肉牛的血清甲状腺素(T3、T4)水平升高,皮质醇(COR)含量下降。血清总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性均提高,丙二醛(MDA.)含量降低。金银花提取物组的血糖、总蛋白、白蛋白水平均比对照组显著升高(P<0.05);尿素氮和甘油三酯的含量无显著差异(P>0.05);0.6%添加组血清总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量均显著低于对照组(P<0.05),其他各组无差异。这表明金银花提取物添加后可改善肉牛抗氧化性能,促进蛋白质和能量代谢,调节脂肪代谢,缓解肉牛热应激反应;且尤以0.2%和0.6%的添加水平效果较好。试验三:为了进一步探讨金银花提取物对肉牛的抗热应激机制,本试验选择0.2%金银花提取物为适宜添加水平,对供试牛放血屠宰,测定肝脏和肌肉中抗氧化指标及抗氧化酶的相对表达量。结果显示,金银花添加组的肝脏中的丙二醛(MDA)含量与对照组相比下降了48.53%(P<0.05),肌肉总抗氧化酶(T-AOC)活性显著高于对照组(P<0.05),但MDA含量差异不显著;添加金银花提取物对试验牛肝脏和肌肉中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)的mRNA表达量均无显著影响(P>0.05)。这说明金银花提取物具有提高热应激肉牛抗氧化功能的作用,但其作用机制与抗氧化酶系统的基因表达无关。