血浆外泌体miRNA在白癜风病期评估中的作用初步研究

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目的 研究进展期和稳定期白癜风患者血浆外泌体miRNA的差异表达,探讨血浆外泌体miRNA在白癜风病期评估中的作用。方法 收集2021年1月至2021年8月期间在浙江中医药大学附属杭州第三医院诊治的进展期白癜风患者,稳定期白癜风患者和健康体检者各10例,每例采集各20ml血液标本。采用Plasma/Serum Exosome Purification Kits试剂盒提取血浆外泌体,进一步采用Exosomal RNA Isolation Kit提取外泌体small RNA,并采用Illumina Hiseq2500进行高通量测序。对血浆外泌体miRNA的测序结果进行差异筛选、靶基因预测、GO和KEGG功能富集分析,具体方法包括:外泌体miRNA的靶基因通过比对miRNA靶基因预测数据库(miRDB、miRTarBase和TargetScan)预测获得;血浆外泌体miRNA的诊断效能通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价;Cytoscape软件用于绘制共表达网络图。通过生物信息学方法初步筛选出与白癜风临床病期密切相关的血浆外泌体miRNA。结果 与健康对照组相比,进展期白癜风患者血浆外泌体中有141个miRNAs表达存在显著差异,稳定期白癜风患者血浆外泌体中有365个miRNAs表达存在显著差异(P<0.05)。其中hsa-miR-487b-3p在进展期白癜风患者中显著低表达(P<0.05),而在稳定期白癜风患者中其表达与健康对照组无显著差异。基于ROC曲线分析(AUC=0.840),hsa-miR-487b-3p表达量在白癜风进展期和稳定期的病期判断方面可能具有较高的诊断价值。进一步结果分析发现:hsa-miR-487b-3p的表达量还与白癜风体表面积(BSA)呈正相关。通过生物信息学数据库预测,hsa-miR-487b-3p的靶基因共有41个,KEGG分析后发现主要富集于苯丙氨酸代谢、聚糖降解、蛋白质输出等代谢途径。结论 进展期和稳定期白癜风的血浆外泌体miRNA表达存在显著差异,提示外泌体中的miRNA可能参与了白癜风的病情进展,其中hsa-miR-487b-3p有潜力成为评估白癜风进展期和稳定期的生物学标志物。
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