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目的:临床与实验研究表明固本防哮饮(Gu-Ben-Fang-Xiao decoction,GBFXD)治疗哮喘缓解期(asthmainremissionstage,ARS)疗效显著。近期研究发现,靶向肠道菌群可有效防治哮喘。本研究主要探究固本防哮饮通过调控肠道菌群治疗ARS的机制。方法:使用OVA-RSV联合诱导激发构建ARS小鼠模型。通过检测清醒状态下的增强呼吸间歇(enhanced pause,Penh)以及麻醉状态下的气道阻力(resistance of airway,Rrs)来评估小鼠气道高反应性;使用流式细胞术(flow cytometer,FCM)检测肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中总炎性细胞数:使用苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)评估肺组织病理;通过16S rDNA测序检测并分析结肠内容物中细菌的结构及含量;分别采用气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)、酶联免疫吸附试验检测粪便和血清中短链脂肪酸(short-chainfatacid,SCFAs)含量;运用FCM检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中调节性T细胞(regulatoryT cell,Treg)的相对比例;分别采用共饲养实验和广谱抗生素混合物(antibiotic cocktail,ABX)干预-乙酸回补实验探讨肠道菌群以及代谢物乙酸在固本防哮饮防治ARS疗效机制中的作用。结果:(1)肺功能、肺组织病理及BALF细胞计数:与CTRL组相比,使用不同浓度梯度乙酰甲胆碱激发后,ARS模型小鼠Penh及Rrs均明显增加,固本防哮饮干预显著改善了ARS模型小鼠异常增加的Penh及Rrs;ARS模型小鼠支气管周围、血管周围炎性细胞浸润明显加重,BALF中总炎性细胞数增加,固本防哮饮干预有效减轻小鼠肺组织病理的严重程度、减少BALF中总细胞数量;(2)结肠菌群、粪便及血清SCFAs检测:与CTRL组相比,ARS模型小鼠结肠内容物中优势菌群组成显著改变,主要表现为:拟杆菌(Bacteroidetes)丰度明显增加而厚壁菌(Firmicutes)所占比例下降;在门、科、属水平上,固本防哮饮的干预一定程度上改善了ARS模型小鼠结肠菌群的失调情况,即提高了结肠中厚壁菌(Firmicutes)与拟杆菌(Bacteroidetes)的比值以及厚壁菌(Firmicutes)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)与双歧杆菌科(Bifidobacteriaceae)等具有产SCFAs能力的细菌相对丰度。ARS模型小鼠粪便中乙酸、丁酸、丙酸以及血清中总SCFAs含量均显著降低。固本防哮饮干预明显增加了小鼠粪便中乙酸、丙酸以及血清中SCFAs的含量;(3)共饲养实验:共饲养实验后,Co-GBFXD组小鼠粪便中乙酸含量显著低于GBFXD组。而与Model组小鼠相比,Co-Model组小鼠粪便中乙酸含量则呈一定增加的趋势(P=0.117)。Co-Model组小鼠BALF中总细胞数明显低于Model组;与GBFXD组相比,Co-GBFXD组小鼠BALF中总细胞数表现出一定增多的趋势。尽管Co-GBFXD组小鼠的支气管和血管周围炎性细胞浸润程度较Model组轻,但与GBFXD组相比,Co-GBFXD组小鼠支气管周围和血管周围炎性细胞浸润程度更加明显;(4)ABX干预-乙酸补充实验:抗生素处理后,G-ABX组小鼠粪便中乙酸含量较GBFXD组明显减少。而G-Ace组粪便中乙酸的含量与GBFXD组无显著差异。G-ABX组小鼠BALF中总细胞数及肺组织炎性细胞浸润程度明显增加,G-Ace组BALF总细胞数、肺组织炎性细胞浸润程度均显著低于G-ABX组,与GBFXD组无显著差异;(5)PBMCs中Treg细胞比例:与CTRL组相比,Model组小鼠PBMC中Treg细胞比例显著下降,固本防哮饮干预提高了 Treg的相对比例。共饲养实验后,Co-Model组小鼠Treg 比例较Model组提高,且Co-Model与Co-GBFXD共饲养两组小鼠间无显著差异;在ABX干预-乙酸补充实验中,与GBFXD组相比,G-ABX组小鼠PBMC中Treg细胞比例显著降低,乙酸回补后,G-Ace组小鼠PBMC中Treg细胞比例较G-ABX显著提高,并与GBFXD组相似。结论:(1)OVA-RSV联合诱导的ARS模型小鼠存在气道炎症和肺功能异常,固本防哮饮可改善ARS模型小鼠肺功能,减轻ARS小鼠肺部炎症,药效学作用明确;(2)固本防哮饮可一定程度上改善ARS模型小鼠结肠菌群的失调状态,增加小鼠结肠中产SCFAs细菌的相对比例,提高粪便以及血液循环中SCFAs的含量(尤其是乙酸的含量),提示肠道菌群及其代谢物乙酸可能参与固本防哮饮防治ARS的机制;(3)在共饲养和抗生素干预-乙酸回补实验中,菌群的传递、部分耗竭以及乙酸盐的补充均直接影响到固本防哮饮对ARS模型小鼠PBMC中Tregs分化的作用、对肺部炎症的改善作用,提示调控“肠道菌群-乙酸-Treg”轴可能是固本防哮饮改善ARS小鼠肺部炎症的内在机制;(4)ARS模型小鼠存在结肠菌群失调,肠道菌群失调可能与ARS的病理机制相关;调控“肠道菌群-乙酸-Tregs”轴可能是ARS防治中较有前景的研究策略。