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目的:以免疫组织化学方法检测肝内胆管癌组织与癌旁组织间Sirt3表达差异,并分析其临床意义;以免疫印迹半定量方式检测Sirt3及HIF-1 α在肝内胆管癌与癌旁组织的表达差异;WST-1方法检测两者间MnSOD酶活力差异,并进行三者间相关性研究与分析。方法:收集2015年1月至2016年10月间在湖南省人民医院肝胆外科接受肝内胆管癌手术治疗的33例术后病理诊断证实为肝内胆管(ICC)患者病例资料及其切除标本。以2010年发布的第七版美国肿瘤联合会(AJCC)TNM分期系统进行肿瘤分期。其中患者肿瘤组织作为实验组,癌旁组织作为对照组。第一步,采取免疫组织化学方法检测Sirt3在ICC组织与癌旁组织内的表达;第二步,采取Western-blotting方法检测Sirt3与HIF-1 α在ICC组织和癌旁组织的相对表达量;第三步采取WST-1法检测ICC组织与癌旁组织内MnSOD酶活力。分析ICC组织内Sirt3阳性表达的临床意义,Sirt3与HIF-1α相对表达量及MnSOD酶活力间的相关性。结果:1免疫组化结果1.1 ICC组织中Sirt3阳性表达率45.5%(15/33)低于癌旁组织中Sirt3阳性表达率100%(33/33),有统计学意义(P<0.05)。1.2 Sirt3表达临床意义:ICC组织中,Sirt3表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期相关,有统计学意义(P<0.05);与病人性别、年龄、肿瘤直径不相关,无统计学意义(P>0.05)。2 Western-blotting 结果ICC组织Sirt3相对表达量(0.349±0.194)低于癌旁组织中Sirt3相对表达量(0.816±0.287),有统计学意义(P<0.05);ICC组织中HIF-1α相对表达量(0.655±0.105)高于癌旁组织HIF-1 α相对表达量(0.241±0.227),有统计学意义(P<0.05)。3 MnSOD酶活力检测结果ICC 组织 MnSOD 酶活力(0.589±0.094U/mg)低于癌旁组织MnSOD酶活力(1.086±0.508U/mg),有统计学意义(P<0.05)。4相关性研究结果Sirt3表达与HIF-1α表达呈负相关,Sirt3表达与MnSOD酶活力呈正相关,HIF-1 α表达量与MnSOD酶活力呈负相关。结论:1.ICC组织中Sirt3低表达,与ICC的淋巴结转移、分化程度、临床分期相关;HIF-1α表达升高,MnSOD活力降低;Sirt3表达与HIF-1 α表达呈负相关,与MnSOD活力呈正相关,HIF-1α表达与MnSOD活力呈负相关。2.ICC组织中,Sirt3低表达与肿瘤发生、发展相关,可能机制为HIF-1 α依赖的促瘤因子表达升高,组织内ROS相关氧化应激损伤增加。