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现代农业的发展离不开农药的使用,但农药残留带来的不仅是环境污染、食品安全问题,还有影响国民经济发展的问题。目前检测农药残留主要依靠仪器分析方法,但仪器检测成本高,难以普及,因此,为了加大对农药残留的监测力度,满足市场需求,保证食品安全,建立一种高灵敏度、高通量、方便快捷,并且能适用于各种场合的农药残留快速检测方法,具有十分重要的意义。本研究以腐霉利、氟乐灵、异丙威及甲霜灵四种农药为研究对象,制备出了特异性强、灵敏度高的单克隆抗体,在此基础上,建立相应的间接竞争酶联免疫分析方法（ic-ELISA）和胶体金试纸条分析方法（GICA）,以用于实际样本检测。首先基于腐霉利、氟乐灵、异丙威、甲霜灵四种药物的结构分别设计合成了半抗原,并通过碳二亚胺（EDC/NHS）法使半抗原与载体蛋白偶联合成完全抗原,经紫外可见分光光度计鉴定偶联成功后用其免疫BALB/c小鼠,筛选出具有阳性脾细胞的小鼠进行细胞融合,经过3次亚克隆筛选、腹水制备、抗体纯化等步骤后,最终获得了四种药物的单克隆抗体:腐霉利1E6、氟乐灵2D7、异丙威1E1、甲霜灵2E2,亲和力常数分别为:6.9×108L/mol、9.4×108L/mol、6.2×108L/mol、7.5×108L/mol,抗体亚型分别为:IgG1、IgG2b、IgG1、IgG3。基于上述四种单克隆抗体,建立了腐霉利、氟乐灵、异丙威、甲霜灵的ic-ELISA检测方法,并对方法中的标准品稀释液进行了优化选择。在最佳条件下测得的四种单克隆抗体的半数抑制浓度(IC50)分别为2.13 ng/m L、4.06 ng/m L、1.04 ng/m L、0.54 ng/m L,检测线性范围分别为:1.79～6.676 ng/m L、1.47～11.21 ng/m L、0.381～3.77 ng/m L、0.151～1.82ng/m L;与对应药物结构类似物的交叉反应率均小于1%。在不同的实际样本中四种药物的添加回收率均在90%～120%范围内,变异系数均小于10%,可用于实际样本检测。最后针对四种单克隆抗体建立了相应的GICA检测方法,并对实际样本进行了检测。腐霉利试纸条在韭菜、玉米、辣椒、黄瓜样本中的消线值分别为1000 ng/g、1000 ng/g、200 ng/g、200 ng/g;氟乐灵试纸条在黄瓜、辣椒、大米样本的消线值分别为200 ng/g、500 ng/g、500 ng/g;异丙威试纸条在玉米、辣椒、大米样本的消线值分别为20 ng/g、50ng/g、200 ng/g;甲霜灵试纸条在大米、辣椒、烟草样本中的消线值分别为20 ng/g、50ng/g、200 ng/g。四种试纸条均有良好的灵敏度,能够满足市场需求,可以用于农产品中农药残留的现场快速检测。