祛风活血丸对EAU大鼠模型房水白细胞计数和TGF-β2表达影响的研究

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目的:通过观察实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveoretinitis,EAU)大鼠的眼部症状及体征改变情况,以房水白细胞计数、葡萄膜TGF-β2表达为观察指标,客观评价祛风活血丸的治疗效果,并探讨白细胞、TGF-β2在葡萄膜炎发生发展过程中的作用。方法:1、EAU模型建立:SPF级Lewis大鼠60只,右后足垫下注射IRBP混合乳剂建立实验性自身免疫性葡萄膜炎模型,空白对照组10只,右后足垫下注射无菌生理盐水;2、祛风活血丸治疗:将造模成功的55只大鼠分为5组,即模型对照组、祛风活血丸低剂量组、祛风活血丸中剂量组、祛风活血丸高剂量组、阳性对照组,祛风活血丸低、中、高剂量组分别予以不同剂量祛风活血丸灌胃,阳性对照组予以熊胆开明片灌胃,模型对照组及空白对照组予以生理盐水灌胃,观察大鼠眼部的表达情况;3.分别于灌胃后第7天、14天、21天、28天分批处死,取房水涂片检测白细胞计数,并以免疫组织法检测中葡萄膜中TGF-β2表达。结果:1.成功诱发Lewis大鼠的EAU模型,诱发成功率为91.7%,免疫5d后开始出现葡萄膜炎症状,第14d达到高峰,炎症反应剧烈;2.房水白细胞计数:造模后与空白对照组相比,模型对照组均有明显统计学差异(P<0.01);药物治疗后大鼠房水白细胞计数明显降低,其中以中、高剂量组最为明显,各时间段均有明显统计学差异(P<0.01);低剂量组于给药后第7天及第14天无明显统计学差异(P>0.05),至给药第21天,有明显统计学差异(P<0.01);阳性对照组于给药后第14天有明显统计学差异(P<0.01);3:葡萄膜TGF-β2表达:造模后与空白对照组相比,模型对照组均有明显统计学差异(P<0.01);药物治疗后大鼠葡萄膜TGF-β2含量明显降低,其中以中、高剂量组最为明显,各时间段均有明显统计学差异(P<0.01);低剂量组于给药后第7天有明显统计学差异(P<0.01),第21天有统计学差异(P<0.05),第14天及第28天无明显统计学差异(P>0.05);阳性对照组于给药后第14天及第21天有明显统计学差异(P<0.01),第7天及第28天有统计学差异(P<0.05)。4.未经药物干预的EAU大鼠房水白细胞数及葡萄膜TGF-β2表达于炎症高峰期增多,炎症消退期下降,这可能与机体自主调节自身免疫功能相关。结论:1.用IRBP抗原右足后垫下注射可诱发EAU模型;2.祛风活血丸治疗EAU模型有效,灌胃后大鼠房水白细胞计数及葡萄膜TGF-β2表达明显降低,至给药后28天左右基本消失,药物治疗有效,其中中剂量组与高剂量组对比治疗效果无明显差异,但中、高剂量组治疗效果皆优于低剂量组及阳性对照组。说明祛风活血丸能有效减轻前房炎症,减少炎症细胞浸润,保护眼部结构进一步损害,调节免疫状态,对葡萄膜炎发挥治疗作用。
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