人尿抗菌和抗瘤肽的活性研究

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人尿中含有多种有用成分,如尿激酶,抗瘤酮等。本文从正常人尿中分离纯化到了一种既能抗菌又能抗肿瘤的小肽类物质,并对其抗菌活性和抗肿瘤活性及机理的作了研究。 采用疏水层析和两次HPLC得到抗菌肽UAP(uricantibacterialpeptides,简称UAP),检测波长为230nm,以抑菌圈方法测定UAP的抗菌谱,通过电子显微镜观察细菌在UAP作用下的生长情况,并以液体和固体两种方法测定其MIC50和MIC90。UAP对几种革兰阴性菌和阳性菌都有明显的抑制作用,特别引人注意的是UAP对有的耐药菌如肺炎克雷伯氏菌也有很强的抑制作用。UAP对金黄色葡萄球菌和假单孢菌的MIC50分别为0.2μg/ml和0.07μg/ml。 用MTT的方法测定UAP对人肝癌7721细胞的抑制率,UAP对人肝癌细胞7721的IC50为37.2μg/ml。用3H参入法测定UAP对人肝癌7721细胞DNA合成有抑制作用,当UAP剂量为0.3mg/ml时,抑制率接近90%。采用流式细胞仪分析UAP对细胞周期的影响,UAP剂量为0.4mg/ml时,处于S期的细胞减少,G2期的细胞增加,这说明UAP使肿瘤细胞阻滞在G2期。UAP对人脐静脉内皮细胞ECV也有抑制作用,UAP浓度为0.2mg/ml,0.4mg/ml和0.6mg/ml时,抑制率分别为42.8%,60.7%和89.3%。以上实验结果提示UAP不仅可直接抑制肿瘤细胞的增殖,影响DNA的合成和细胞周期,而且还促进肿瘤附近血管内皮细胞的凋亡,导致血管的萎缩,使得肿瘤得不到足够的营养物质补充,最终产生抗瘤的作用。
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