壳聚糖/葡聚糖/纳米羟基磷灰石复合水凝胶引导骨再生的实验研究

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水凝胶作为支架材料已在骨组织工程领域应用,天然水凝胶生理状态下溶解性差,机械强度低,且在大块骨缺损中应用的研究甚少。本课题壳聚糖、葡聚糖分别经羧乙基化及氧化改性后,通过动态亚胺键(席夫碱,Schiff-base)的形成,获得内部为交织的多孔结构、具有自修复性能的复合水凝胶;加入纳米羟基磷灰石(nano-Hydroxyapatite,nHAp)可增加复合水凝胶的机械强度,增强承受组织压力的能力。本研究中对复合水凝胶的理化性能、生物学性能及在骨缺损中的修复情况进行检测,探索其作为骨支架材料的可行性。目的:制备壳聚糖/葡聚糖/nHAp可注射复合水凝胶,检测其理化性能及生物学性能、动物体内骨缺损修复性能,探索其作为骨支架材料的可行性。方法:首先制备水凝胶的两种前体溶液:N-羧乙基壳聚糖(N-carboxyethylchitosan,CEC)及氧化葡聚糖(Oxidized Dextran,ODex),然后进行理化性能、细胞毒性及生物相容性的相关检测。进一步将nHAp悬浮于CEC溶液中,通过双管注射器注射至骨缺损区域,8周及12周后采用X线成像及组织切片染色观察骨缺损区域的修复情况。结果:大体观实验表明,席夫碱的存在是自修复能力的基础。流变测试表明此种水凝胶可迅速凝胶化,且具有一定的机械强度。水凝胶中大量的自由醛基可与其相邻的氨基相互作用形成亚胺键,使得水凝胶具有良好的组织粘合作用。体外的细胞毒性试验及体内降解试验,均表明此种水凝胶具有良好的生物相容性。8周、12周后评估骨缺损区域的修复效果,X线成像实验及组织切片染色表明,负载有nHAp的组合水凝胶显示出更快、更好的骨修复能力。结论:研究表明,经羧乙基化及氧化改性后获得的可注射、自修复多糖复合水凝胶可促进骨缺损的修复,为骨组织工程领域的应用提供研究依据。
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