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我国是一个生猪生产大国,猪骨加工具有重要意义。猪骨胶原多肽是将猪骨胶原水解而得到的具有特殊生理功能的一系列多肽的总称。胶原多肽具有很多的特殊生理功能,抗氧化功能是其重要的功能之一。本研究较系统地研究了猪骨胶原多肽的制备条件和抗氧化功能。 1.猪骨胶原多肽的制备 在确定了中性蛋白酶适合制备猪骨胶原多肽的基础上,采用五元二次回归正交旋转组合设计的方法,对中性蛋白酶酶解制备胶原多肽建立了如下的回归方程: Y=52.57+5.8X1-2.84X2+2.02X3+7.62X4+6.85X5+0.25X1X2+1.01X1X3+1.3X1X4+2.14X1X5-0.19X2X3-0.73X2X4+0.78X2X5+0.53X3X4+0.17X3X5+0.66X4X5+1.16X12-3.29X22-3.36X32-4.91X42-3.41X52 经方差分析检验显示该回归方程失拟性不显著,拟合度高。在建立回归方程的基础上,采用统计选优法对中性蛋白酶酶解制备胶原多肽的最优酶解条件进行了预测,结果显示最优酶解条件为:[E]/[S]=9.8%~10%,[S]=3%~3.6%,pH=7.5~7.7,T=46.4℃~48.1℃,t=4.5h~4.8h。 采用葡聚糖凝胶(Sephadex G-25)对猪骨胶原多肽进行洗脱分级,得到6个级分,各级分对超氧阴离子的清除能力大小不一,其中清除能力最大的一个级分的半抑制浓度(IC50)为4.11mg/ml。 2.猪骨胶原多肽的抗氧化功能研究 采用H2O2为氧化剂检测胶原多肽的抗氧化能力。结果表明:胶原多肽具有较强的抗氧化能力,其抗氧化能力仅次于二丁基羟基甲苯(BHT),大于谷胱甘肽(GSH)和抗坏血酸(Vc),而且抗氧化能力随着浓度的增大而增强。 采用Fenton反应体系对胶原多肽的羟基自由基清除能力进行了检测。结果表明:胶原多肽具有较强的羟基自由基清除能力,其清除能力略大于谷胱甘肽,随着浓度的增大而增强,而且无助氧化作用。 采用猪油、菜油和豆油体系对胶原多肽抑制油脂氧化作用进行了检测。结果表明:胶原多肽具有较强的抑制油脂氧化作用,其在菜油和豆油体系中抑制作用大于在猪油体系中抑制作用;BHT和抗坏血酸均对胶原多肽具有明显的协同效应。 研究了胶原多肽对小鼠肝组织匀浆、小鼠肝线粒体和大鼠红细胞氧化的抑制作用。结果表明:胶原多肽对三个体系丙二醛(MDA)的生成均有较强的抑制作用。