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果蝇作为一种典型的模式生物，在昆虫和人类的天然免疫研究中一直占有重要的地位。现今，许多关于天然免疫的研究结果都是从对果蝇的研究中发现的。果蝇Schneider2(S2)细胞株来自黑腹果蝇培养末期的胚胎，其许多特征显示与果蝇巨噬细胞类似。果蝇S2细胞的培养简单、高效，且同时具有哺乳动物表达系统和昆虫表达系统二者的优良特征，是一个高效率的表达系统。Jumeau（Jumu）蛋白是果蝇体内的一个重要的转录因子，编码719个氨基酸，是首个被发现的具有双重功能的FKH/WH家族蛋白，能引起异染色质的大规模修饰。但是目前Jumu蛋白在果蝇天然免疫中的作用及转录调控机制还不十分明确。 本实验以L.Giot及KG.Guruharsha等人的研究结果—果蝇Jumu蛋白与Cos、CG5375及L(1)sc之间存在潜在的蛋白相互作用—为基础。通过构建以GFP蛋白为标签的重组质粒，制备高效率的GFP多克隆抗体，利用果蝇S2细胞系蛋白表达系统，蛋白免疫共沉淀技术来验证Cos、CG5375及L(1)sc与Jumu的相互作用。结果显示，果蝇Jumu蛋白与Cos、CG5375及L(1)sc蛋白之间不存在相互作用。为此，我们通过转染空载体pMK33-Flag作为阴性对照和pMK33-Flag-Jumu full length重组质粒到果蝇S2细胞中并筛选稳定的细胞表达体系，利用蛋白免疫共沉淀技术结合双向电泳实验筛选与Jumu蛋白相互作用的蛋白。通过相关软件对双向电泳凝胶图像分析，共筛选出7个差异蛋白，其相对分子量分别为141KDa，82 KDa，69 KDa，44 KDa，38 KDa，27 KDa和26 KDa。根据以上筛选结果，我们对这些差异样品点进行抠点处理并消化，进行质谱分析。最终得到这些差异点的具体氨基酸序列，进行数据库检索得到其所属蛋白为Act5C，Hsc70-3，Rpn6，betaTub56D和CG10306。因而，接下来我们将会通过免疫共沉淀技术对这些相互作用进行验证。