论文部分内容阅读
据文献报道,山豆根多糖具有良好的抗氧化活性和显著的保肝降酶作用。目前,山豆根多糖提取分离纯化研究已有涉及,而对山豆根多糖进行硫酸化修饰及其生物活性研究尚未见详细报道。
本实验主要对山豆根多糖的提取、硫酸化修饰及其生物活性三部分内容进行了研究。通过实验从山豆根中提取得到山豆根水提多糖(SSa)含量为94.5%和山豆根碱提多糖(SSb)含量为93.7%(均以葡萄糖计)两种多糖,采用高效凝胶色谱法对多糖进行分子量的测定,SSa主要含两种多糖,其分子量分别为4784、13642;SSb主要含两种多糖,其分子量分别为4714、1118523。
在山豆根多糖硫酸化条件方面对氯磺酸-吡啶法加以改进,以硫酸基取代度、产物量为考察指标,采用L9(34)正交试验法对反应温度、试剂配比和反应时间三个方面优选合成山豆根水提多糖硫酸酯(sSSa)的工艺。实验结果显示,SSa硫酸化适宜的反应条件为:氯磺酸:吡啶(1:5),反应温度60℃,反应时间3 h。山豆根碱提多糖硫酸酯(sSSb)的合成参考sSSa的适宜反应条件。通过山豆根多糖硫酸化前后的红外图谱分析,表明硫酸基与多糖已结合成酯,sSSa中硫酸基的取代度(DS)为0.78,sSSb中硫酸基的DS为0.86。
结合小鼠α—萘异硫氰酸酯(ANIT)中毒性胆汁瘀积肝损伤模型,以反映肝损伤程度最敏感的血清生化酶谷丙转氨酶(ALT)为考察指标,对SSa、SSb、sSSa和sSSb进行初步的保肝药效实验。实验结果表明SSb在本次实验中表现出明显的降酶效果(P<0.05),推测其可能具有一定的保肝作用。而SSa、sSSa和sSSb均有降低中毒性胆汁瘀积肝损伤小鼠血清中异常升高的ALT水平的趋势,但无统计学意义,且硫酸化修饰不能提高山豆根多糖的保肝降酶作用。
通过山豆根水提多糖及其硫酸酯的体外抗HBV实验,表明硫酸化能提高对乙型肝炎病毒细胞转染的2215细胞培养液中HBeAg的抑制作用。