候选基因多态性、甲基化与新疆汉族阿尔茨海默病的关联性研究

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目的:阿尔茨海默病(AD)是由多种基因共同作用的渐进性神经系统性质改变的疾病。我们进行了一项试点研究,试图探讨五个与AD相关的基因,包括γ-分泌酶复合物b(APH1B),人朊病毒蛋白基因(PRNP),羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR),沉默信息调节因子2同源物1(SIRT1),载脂蛋白E(APOE)的SNPs与新疆地区汉族阿尔茨海默病的关联性,同时,我们试图确定Bcl-2相关X蛋白(BAX)启动子甲基化和APOE启动子甲基化是否与新疆汉族AD相关。方法:选取2014年至2015年在本院干部病房(老年医学专业)住院且年龄大于60岁的汉族老人,由年资较高的神经内科医生、老年病科医生根据DSM-IV标准进行诊断,从中选取诊断为AD的患者17例作为病例组(其中男性7例、女性10例),平均年龄75.65±5.86岁;从同期住院的患者中,选取年龄、性别、族别、文化水平等与病例组相匹配的正常老年人34例为对照组(其中男性17例、女性17例),平均年龄77.59±7.41岁。使用Sanger测序对与AD相关基因的六个位点,包括APH1B rs1047552,PRNP rs1799990,HMGCR rs3846662,SIRT1 rs7895833,APOE rs7412和rs429358进行SNP基因分型,比较基因多态性与新疆汉族阿尔茨海默病关系。使用实时定量PCR(QMSP)技术对APOE,BAX两个基因进行DNA甲基化水平的测定,比较甲基化与新疆汉族阿尔茨海默病关系。结果:(1)研究结果表明由APOE rs7412和rs429358构成的APOEε4等位基因与AD相关(χ2=9.718,P=0.002),而APH1B rs1047552,PRNP rs1799990,HMGCR rs3846662,SIRT1 rs7895833基因多态性在病例组和对照组间未发现差异有统计学意义(P>0.05)。(2)按是否携带APOEε4分层,APH1B rs1047552,PRNP rs1799990,HMGCR rs3846662,SIRT1 rs7895833基因多态性在两组间未发现差异有统计学意义(P>0.05)。(3)AD患者中BAX启动子甲基化的水平低于对照组(t=-2.078,P=0.045),进一步按性别分层,女性AD患者BAX甲基化水平低于对照组(t=-2.230,P=0.046),按是否携带APOEε4分层后在病例及对照组间均未发现差异有统计学意义(P>0.05)。(4)APOE启动子甲基化水平在病例组和对照组间未发现差异有统计学意义(P>0.05),进一步按性别分层,未发现有统计学差异。按是否携带APOEε4分层,携带APOEε4基因的AD患者的甲基化水平相对较高(t=2.480,P=0.025)。(5)在病例及对照组中,未发现年龄与APOE、BAX甲基化水平有相关性(P>0.05)。按性别进一步分组后分析,未发现APOE,BAX甲基化水平与年龄有相关性(P>0.05)。结论:(1)在所测六个SNP(APH1B rs1047552,PRNP rs1799990,HMGCR rs3846662,SIRT1 rs7895833,APOE rs7412和rs429358)中,发现由APOE rs7412和rs429358构成的APOEε4等位基因与新疆汉族AD存在关联,提示携带APOEε4可能是AD的危险因素之一。(2)病例组中BAX基因启动子甲基化水平低于对照组,在女性中尤为明显,提示BAX启动子低甲基化可能是新疆汉族女性AD的风险因素之一。(3)AD患者中携带ε4的APOE甲基化水平相对较高,提示APOEε4对AD患者甲基化水平可能有一定影响。
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