滑膜间充质干细胞与软骨细胞三维条件下体内培养成软骨的研究

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目的:滑膜间充质干细胞具有多向分化的潜能,其优点是成软骨能力强,有希望成为修复软骨缺损的种子细胞,本研究将SD大鼠滑膜间充质干细胞/软骨细胞混合培养于壳聚糖/I型胶原复合支架材料中移植于SD大鼠皮下后,观察细胞支架复合物成软骨的能力。方法:(1)无菌条件下取SD大鼠关节滑膜组织及软骨组织,用酶消化法获得滑膜间充质干细胞及软骨细胞分别进行培养,体外扩增。(2)取第3代滑膜间充质干细胞及第2代软骨细胞,根据支架材料接种细胞类型的不同,设单纯软骨细胞组(A组),单纯滑膜间充质干细胞组(B组),滑膜间充质干细胞:软骨细胞为1:2组(C组),无细胞支架材料组(D组),培养于支架材料中移植于SD大鼠皮下,经过4周,8周进行形态学,HE染色,甲苯胺蓝染色,免疫组织化学检测。结果:回植4周,8周后,支架材料保持圆盘状,表面附有一层筋膜,HE染色显示8周时细胞进入材料内部较4周时明显增多,4组经免疫组织化学检测,A、C组可见细胞及细胞基质II型胶原阳性表达,甲苯胺蓝染色,A、C组蛋白聚糖阳性表达。结论:两组细胞混合培养于支架材料中,能够形成软骨样组织。
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